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楼主: 86964109
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[请教] 关于干细胞软骨诱导的疑问   [复制链接]

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发表于 2012-11-8 20:19 |只看该作者
86964109 发表于 2012-11-8 08:12 % |3 _9 y' i+ P4 ~: ]
回复 如来的观音 的帖子
  E, Z& j1 W( s0 R- G* X" L  C1 G: Z9 X' ~$ b3 q
哦 我们看到的是差不多的,micro;g/ml 是微克/ml,毫克是milligram
  y7 F$ H  b0 {" N) y) l1 d* ]
原来如此,英文太差劲了,呵呵

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发表于 2012-11-9 08:26 |只看该作者
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9 I1 f; x; G6 w" l* I& s- U; x; ]0 p4 V# K" U" I
嘻  也是现查的

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发表于 2012-11-9 12:02 |只看该作者
6.25ug/mL BSA和6.25 mg/mL BSA是针对不同种属的细胞而言,前者用于rabbit,后者用于human和鼠等。
3 B) M6 N8 f2 ]8 d& x. t' D$ e对于是否需要聚团培养,答案是不一定,经典的当然是团块诱导,但现在很多是把细胞聚集于3D生物支架材料中,目的是模拟体内软骨分化的最初环境,即细胞聚集阶段。
8 C" Y% e. E8 z4 P阿利新蓝和甲苯胺蓝染色效果差不多,番红O也是常用手段,如果可以的话,建议最好用免疫组织染色,这样特异性更强,可以避免很多背景颜色。
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发表于 2012-11-13 01:31 |只看该作者
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. Q& _/ p4 q4 q& A$ P
2 W+ H1 n" @' l9 y# w成软骨诱导应该不需要胰岛素吧,地塞米松的浓度好像也太高了。这个protocol怎么看怎么像诱导成骨的。
% R  U- d4 g# R: B1 ?而且,少了proline这个成分吧
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发表于 2012-11-13 01:35 |只看该作者
回复 86964109 的帖子* |) ~* z8 w: B( x% L* `  x) [
  a! t7 ^2 d9 ^/ X+ {
2.鉴定诱导是否成功阿利辛兰染色和甲苯胺蓝染色哪种比较好?0 m! {. K: j1 P4 I' ?9 j
我们用阿梨辛兰染色,效果很好。% g+ x4 ?7 _5 C; v5 v

1 I2 T. P0 K6 r3.一定要制成细胞团再诱导吗?
4 n, p9 u$ `: ~5 m+ X1 w+ @' q& t1 T; N8 _+ S0 X) A. q
体外诱导成软骨,我个人认为,细胞成团诱导会大大增强软骨分化效果,因为团状细胞提供了一个3D微环境。经典软骨诱导方法应该是做成pellets体外诱导。
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发表于 2012-11-13 22:06 |只看该作者
回复 valentiboa 的帖子: |; q4 o9 `9 `
* y# q0 Z  r3 X) w% d- D
chondrogenic medium里面不加FBS,insulin肯定要加,这是常用的血清替代物
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