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楼主: huajie881026
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你养的间充质干细胞能传几代?   [复制链接]

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发表于 2012-9-18 19:38 |只看该作者
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. p6 [+ A2 R5 q8 Q' P1 P2 c# d, `; O8 C  }
嗯  受教了   请问您用的是什么培养体系呢?

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发表于 2012-9-18 19:48 |只看该作者
回复 sdwzg119 的帖子4 \7 S: i& k3 {' k. O1 Z

8 n0 S- u$ ~. N+ o请教您脐带是如何分离的?酶消化还是组织块贴壁爬片法?

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发表于 2012-9-19 09:33 |只看该作者
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4 H/ M  e) _# C- }, b( s( i1 D2 i, ?
请问您使用的是什么培养体系呢?是DMEM-LG+10%FBS吗?还是无血清培养基?加bFGF了吗?
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发表于 2012-9-19 09:56 |只看该作者
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传代代数与年龄有关,也有类似的文章。我做同一种动物的,有的8、9代就老化了,有的十几代还问题不大,年龄相似,我想与培养方法也有很大的关系,至于传100代以上,我想那是永生化了吧。本质上,间充质干细胞不是可以无限传下去的细胞,你也不必过虑。
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发表于 2012-9-19 12:17 |只看该作者
如果只是用普通L-DMEM+FBS的话,是很容易变大变宽,细胞分裂变慢的,因为这种培养基不是干细胞培养基啊~ 用点好一些的培养基吧,好多公司都有卖~
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发表于 2012-9-19 12:32 |只看该作者
回复 ditiger 的帖子
- T! r5 I/ N" Z7 E% J1 h
  q4 m% Z, B7 R+ Q8 O) g7 j' u干细胞培养基很贵啊,而且我养细胞很多,消耗很大的!

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发表于 2012-9-19 15:43 |只看该作者
我养的是大鼠的骨髓间充质,最高培养到10代(没继续往下),连续培养,没冻存过。8代以后增值能力较弱,细胞变宽的数量增多。第10代的时候过流式,跟前面的2代没区别。分化能力没对比过。文献说大鼠的能传到60代以上,不过没试过。
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发表于 2012-9-20 09:33 |只看该作者
一般是10代以内做实验都没问题的,听说骨髓间质干可以传到20代。。。。可我没做过这么久!!# `8 Y' S* [/ ~: l1 o5 b
自己做骨髓间质干实验的话,最的代数最大的传到7-8代,一般8代以上的都不拿来做了!  V) a' z8 ~  J' f. m3 A
胚胎干细胞好像没有这个限制,我拿到手的细胞都是10代以上的了,只是帮别人养了一段时间。。。
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发表于 2012-9-25 01:05 |只看该作者
MSC的传代次数和以下几个因素相关:
$ q8 W' ^! L& Z: B培养基情况、研究员操作水平、细胞来源情况" C3 T! a- B5 X4 d: L, s% N% E
不过一般不会传很多代,公司生产用于临床的干细胞也就在P4到P5,
! O2 A" U5 N4 D" W& _7 f传代次数太多的话就算表型和形态都不变,其干性也会降低的。
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发表于 2012-9-25 09:30 |只看该作者
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/ C+ D7 N6 e5 q6 S( P# c. V
( W. |/ f- i* I谢谢指点!
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