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大家说说,都什么情况会染菌呢?

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包包
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发表于 2012-8-21 18:54 |显示全部帖子
细胞的培养预防污染是个首要问题,总是会有各种污染,大家说说在什么情况下会污染细胞,污染的是那种菌,都有什么表现,以及如何预防和染菌以后怎么处理比较好。还有紫外会杀灭所有菌吗?酒精会消灭那些菌?0.22微米的滤膜能滤过所有的菌吗?哪些不能虑过呢?
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金话筒 优秀会员

发表于 2012-8-21 22:05 |显示全部帖子
染菌其实与操作关系不是很大,我以前实验室就经常有不擦酒精、空手做实验也不染菌的,出现的几次染菌一般都是培养基或者是用的东西本身没有灭菌好。细菌处理最简单,如果是孔板,直接把这孔洗掉就行;如果是霉菌,可以用75%乙醇处理2h,然后洗掉,但极有可能再染菌。但如果是摇瓶或是平皿的话,那就认倒霉,直接扔掉吧。
+ `' U7 M: M/ ^: w$ I; k' [* @, t! o1 x紫外的杀菌,我认为基本没用,只是自我安慰而已,除非长时间(》12h),加上75%的乙醇,才有一定的杀菌效果,实验室的一些材料灭菌就是这种方法,但还是容易染菌,实在没办法而为之,不推荐。而且紫外开的时间太长,对人也不好,大量的臭氧熏得人受不了。我一般也就开个30min意思一下,时间紧的话根本就不开。. h/ u2 K# H  C& P
酒精和紫外一样,只是一个预防作用,总比用水擦的好。
, C# l' O) F3 B: `0.22 μm可以过掉细菌,但是支原体过不掉,达到一般的除菌要求没问题。
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发表于 2012-8-22 08:18 |显示全部帖子
紫外线穿透力很弱,杀菌力很差的,另外,紫外还有诱变作用,建议不要使用。
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发表于 2012-8-22 08:31 |显示全部帖子
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细胞培养过程中常出现的污染是酵母菌和支原体污染,酵母菌污染细胞一般会全军覆没,镜下可以看到椭圆形不停做类似布朗运动的酵母菌,而支原体污染一般镜下看不出,只是感觉细胞形态有变化,细胞生长缓慢。出现酵母菌污染一般都是实验人员无菌操作出问题,而支原体污染常见的就是胎牛血清污染了,滤膜是过滤不掉的,我们一般对血清做个支原体检测实验,阳性的话直接扔掉,或者加入一些抗支原体药物用于一些比较粗放的预实验。
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发表于 2012-8-22 08:50 |显示全部帖子
紫外杀菌无外乎两种方式,一是直接照射使细菌蛋白/核酸变性,;第二种是产生臭氧,臭氧是一种强氧化剂,通过呼吸作用进入细菌,使其还原性物质被氧化而影响其生理生化。这两种方式都能导致细菌,真菌的死亡。酒精主要是渗透性杀菌,即通过渗透进入细菌,从而使其胞内蛋白变性凝固。
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发表于 2012-8-22 10:05 |显示全部帖子
一般霉菌污染可以用84,硫酸铜或迭氮钠处理,如果孵箱整个污染,需要正常收拾外,还要用84清洗,再用酒精处理,就是闻道有些大,通气后,调整1到2天再用,不然孵箱PH值改变,也会影响细胞污染
  ]6 Y( u  @6 C+ q  ?8 P
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发表于 2012-8-22 10:06 |显示全部帖子
不过一般很难污染,如果污染,还是从自己的操作上找一下原因

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发表于 2012-8-22 10:08 |显示全部帖子
回复 wcfeng88 的帖子7 k! q; H9 F1 f& r# W" T

* z. X( q& z( i: U. p2 v, H支原体检测实验怎么检测?抗支原体都用什么药?

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发表于 2012-8-22 10:10 |显示全部帖子
回复 cjsbaicai 的帖子+ w! x+ l# O0 V

; \& _8 }6 z0 R( G4 w, C" Q, p酒精渗透多长时间达到效果呢?

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发表于 2012-8-22 10:13 |显示全部帖子
回复 wangzhiqi86 的帖子8 A; |8 D& |! w
% m8 j1 I0 E$ |3 {7 L! T( t/ B3 ]
0.22 μm的虑膜会滤掉真菌吗?菌丝和孢子之类的能吗?
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