细胞复苏后死亡细胞很多的原因？

小猪快跑

请教各位，为什么细胞复苏以后死亡细胞特别多啊？导致复苏细胞死亡的原因有哪些呢？

sdwzg119

这和你的冻存方法有很大的关系，并且即使方法正确，难免也会有细胞死亡的~

aulenuyah

细胞冻存的时候可能会因为处理不当细胞死亡，还有可能就是解冻的时候的事儿，比如解冻时间过长

蒲公英

也有可能与细胞的耐受能力有关，不同种类的细胞的耐受能力不一样；7 S/ v# s* C/ h! j7 h/ \" k
另外也与复苏后的接种方法有关，分为直接接种后过段时间再换液和离心后去除冻存液后再接种；  C3 K+ |- h. Z* X% u
此外，也与冻存时的细胞密度有关~

文文2012

这个影响因素很多，比如细胞种类，细胞适合的冷冻时期等都会造成

文文2012

还有，你最好简单介绍下，你的冷冻细胞和冷冻过程，这样便于大家分析问题
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vanessa

冻存前的细胞，应该尽量分散吹打开；冻存时冷冻处理尽量用程序性降温盒；复苏的时候，从液氮拿出细胞后立马放入37度水浴锅，待冻存细胞90%融化后立即拿出，利用余温把剩下的细胞解冻；解冻后的细胞立即进行后续操作。

huajie881026

我的细胞冻存后复苏效果也不好，很多死细胞，用的是6：3：1的冻存液（按Gibco说明书上做的），因为没有程序冻存盒，每次都是4℃ 30min，-20℃30min，-80℃过夜然后转至LN2。复苏出来大概死了有一半以上，困惑中！

生旦净末丑

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我们一般是-20℃要放置2个小时

生旦净末丑

细胞本身的状态，冻存体系，冻存时的操作手法，复苏时的操作等等都是影响细胞复苏率的关键因素，注意把握