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楼主: luckywen
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[原创] 实用小方法:细胞培养时精确调整细胞浓度   [复制链接]

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发表于 2012-6-14 16:00 |只看该作者
养细胞除非很精确的铺板、接种,一般不用计数。
1 r; W; w" c. Y) p, f4 t我们一般根据细胞长得速度快慢来决定传代的比例。
, F+ a: F# e: I4 k+ H有些细胞长得很快,一传五就两天长满的你还可以稀释倍数更大些。如果不敢确定到底稀释的倍数大了对细胞状态有没有影响,就按不同比例1:5, 1:8, 1:10各传一瓶,找一个这个细胞能承受的底线,根据实验需求调整细胞比例就好。' s- E  J% M# F) y0 Z
若遇到长得很慢的细胞,十几天才长满的那么宝贵的一瓶,刚开始传代最好先一传二(若还成团,还可以考虑一传一,目的是把成团的细胞打散),一般等传过一两代后细胞就会长得快一些,那时候就可按上述的方法试一个合适的传代比例。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-6-15 11:10 |只看该作者
首先在培养细胞的过程中要掌握细胞倍增时间,无论是接种皿、瓶或者板,可以按照培养器皿的直径估算出面积,根据大皿细胞长满时细胞总量,可以估算出其余培养器皿的细胞总量,那么按照自己处理细胞的时间可以估算出应该接种多少细胞,在接种细胞的过程中一定保持细胞充分混匀的状态,这样才能保证细胞接种密度较一致。另外如果只是接种细胞,可以将细胞消化下来直接计数接种细胞,不用离心,吹打细胞次数越多,细胞受损伤的几率越大。细胞计数时,吹打混匀,计数2~3次,差别不大的话求平均值来计算,差别大的话,重新计数或者稀释后计数。另外,在计数时,每个大格中细胞要分布均匀,而且细胞数量不能太多或者太少,否则重新来做。
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发表于 2012-6-15 11:54 |只看该作者
这算什么实用小方法,这难道不是基本的技术方法么?请细胞海洋明鉴!

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小小研究员

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发表于 2012-6-16 01:53 |只看该作者
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回复 南宫燚岚 的帖子7 g! N" D+ a+ P$ z2 ^. n7 V

; J: \- ?9 L4 G1 D. a主要是鼓励新手多发表原创性的经验分享 呵呵

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优秀会员

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发表于 2012-6-18 09:22 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
* |' i! C/ K! O6 f, j) e3 J: F6 |9 y( H) t, b8 M+ b7 i: J
Fine
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