有诱导过EMT的经验人士吗？能不能讨论一下，

一路顺风

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再请假您一下，能不能把细胞铺的很稀，诱导7天，中间不传代，只是补液体呢？3 V% V. U6 m# G$ Y  ?+ ?
非常感谢您！

markllq

回复 一路顺风 的帖子; I  j/ g4 Y% F, v* B; t) j- g
" h! Z/ W. @* E) q' E# s
这些你去查weinberg的paper吧，里面写的很清楚。你铺的再稀，细胞是聚团生长的，只要聚团了就对EMT不利，传代是必须的。

一路顺风

回复 markllq 的帖子- l  X& m* u2 G5 r- N' B5 s' A% }4 Y
  O5 q+ H3 l( z9 e- q( j) H
明白了，谢谢您。感谢您的答复

一路顺风

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( }0 J# ~3 h! T6 x& S* ], K
# H- c6 S1 M2 ?& j9 K您好！我尝试了诱导时，用MEGM加0.5%FBS的培基，加TGFb1，发现没有诱导组细胞形态也发生了变化。能请教您一下：您用的诱导培基是什么吗？非常感谢您！

markllq

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6 X& d3 I; b3 p/ k6 @
; B4 F" j: O- M1 [5 u$ t4 n) ]我们用的是5%的血清，血清里面本来就含有tgfb，所以可能会发生EMT，没有关系，这很正常。weinberg实验室是通过磁珠将EMT的细胞去掉。没有磁珠也可以通过消化时mesenchymal和epithelial消化的时间不同去掉mesenchymal。

一路顺风

回复 markllq 的帖子. I, h" g6 d" w1 i- h
* d  q. U+ t2 f: d" r) D  \4 P
那请问一下，是上皮细胞消化时间短，间叶细胞消化时间长是吗？那您用的是MEGM加FBS吗？2 E- f) D3 g/ e' F
谢谢您！) b2 J# d8 N( t0 A9 L
还有我在帖子里看到您有MEGM配方，能发给我一下吗？非常感谢！我的邮箱：281375927@qq.com
* F6 ~( n- t7 S再次感谢您！

markllq

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& s" y; R3 [3 s4 Z6 b
6 F4 O- g1 X. d3 S6 o0 ?/ F当然是上皮更难消化啊，因为表达E-cadherin等黏附蛋白。细胞培养基配方见附件，我们是自己配的培养基。

一路顺风

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3 E* D1 B( J* r6 e6 u; g" c谢谢您！这样配培养基好省啊，不错！
; A! l( x* |; z请教您：您诱导的时候是用什么培基加5%FBS啊？5 V: I  s* P, A- E
谢谢了！