干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: ying
go

[请教] 请问丝裂霉素C如何保存   [复制链接]

Rank: 4

积分
2917 
威望
2917  
包包
6530  

优秀会员 金话筒

11
发表于 2012-5-2 14:59 |只看该作者
我的MMC也是配成母液后放了快一个月,后来用了一次,感觉效果也还行,没影响
( _% t( `# [% I& O但是后来我还是分装了,冻负20里面,然后加锡纸避光# a# [4 |! j6 T$ I3 t! i
之后冻着的MMC析出了紫黑色的结晶,感觉其实也没有影响,但是你在用之前,一定要把整个结晶融完,直至完全透明(还是呈淡紫色),才能用,不然这个紫黑色的结晶会使得大量细胞死亡(它就像炒菜的时候,菜里面的一坨盐巴)
9 K% n$ G2 c2 x5 f! g! s加入MMC母液的量要视你培养基的量和母液浓度而定,终浓度是10μg每ml,处理2.5h, c1 }! W3 N8 P) A- E
处理后可以用PBS洗了之后直接用,但是也可以先消化下来铺了再用,有的做得比较精细,消化下来后计数,然后再铺,这样比较好一点,因为直接用的话,可能细胞密度太大了,那么饲养层密度太大不是太好! Y/ O  O# A( P, O8 j
养MEF直接10%的FBS就行了,而且不需要灭火,用高糖培养基就行了,没有注意具体成分(个人觉得丙酮酸钠和glutamin的影响不大),DMEM(gibco)就行了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 20 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 20  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 2

积分
259 
威望
259  
包包
912  

优秀会员

12
发表于 2012-5-2 15:45 |只看该作者
10cm培养皿培养基应该加入10mL左右吧
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-6-7 12:18

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.