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回复 愤怒的小鸟 的帖子/ u& L- q5 U4 F3 o, w! F9 v! `/ C
, }1 U, v/ ?( N/ T$ j5 g可参考我们公司的实验方案 lifetechnologies.com/neuroprotocol/nscdiff* Y" |+ k4 J* F( X5 `
目前我们已经对该实验方案汉化,稍后会分享给大家。/ Y- W. {7 X; `9 v4 G; {/ m* H. h1 U
1 m2 h; _; @! A9 O7 e+ c& ^' M分化为神经元" I! |) q+ c" L% s# t5 l
1. 将神经干细胞接种于添加了StemPro® NSC SFM完全培养基的聚鸟氨酸和层粘连蛋白包被的培养皿中,接种密度为2.5 × 104–5 × 104个细胞/cm2。
) q" w/ Z) i5 f! }0 p2. 2天后,将培养基更换为神经干细胞分化培养基。每3–4天更换一次培养基。
, F7 T! {. r: S6 s1 w0 `3. 如果想要加快分化速度,可从分化的第7天起每天在分化培养基中加入0.5 mM双丁酰环磷腺苷 (Sigma,货号:D0627) ,连续作用3天。1 y# L) u2 s; Z2 b2 ]
重要提醒!当细胞分化为神经元后,切勿将细胞暴露在空气中。
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. v8 t; a# v$ g, p" z组分 最终浓度 体积数
& s2 a) Y6 K5 ?- j. PNeurobasal® 培养基 1X 97 mL4 B) n7 O1 L4 p p0 ?
B-27® 无血清添加剂 2% 2 mL. S, k$ h! T6 N+ I" \5 ~
GlutaMAX™-I添加剂 2 mM 1 mL& `# P1 o0 a: c5 o5 y7 L3 w
如果需要快速分化,可以在第7 天加入终浓度为0.5 mM 的双丁酰环磷腺苷(Sigma,货号:D0627),按照分化方案中所示连续作用诱导3 天。 |
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