旧菜翻炒——关于细胞冻存

deron

今天冻存细胞的时候忽然想到，以往不管是程序冷冻还是梯度冷冻，细胞放入-80后，都是等待过夜再转入液氮，那么如果-80放置一两个小时，等冷冻管内液体基本达到-80之后，直接投入液氮中，与过夜相比有没有差别？5 a/ V% U5 ~& i1 b
是否过夜只是一个保险措施，防止冻存管内液体未到-80？有没有大侠关注或者做过类似的实验？

Temin

我们如果NUNC程序降温盒不够用，那在-80度放4小时左右就行，然后拿出来用。

havie

应该不仅是为了使冷冻管内液体达到-80吧,还要使细胞适应这个环境,以及细胞本身的变化.

momocy

不急着用还是过夜好一点，着急用也放上半天再拿出来，还是要等细胞适应了，万一细胞受损了，不值得撒

huangcong1988

其实要看你冻存细胞的种类，而且需要冻存的时间也要考虑的，比如说，细胞只需要短时间冻存，那么你直接梯度降温后放负80就可以不管了，到时候要用直接取出来复苏就行
8 O+ @9 X: t% ~3 ^但是如果你要长时间冻存的话，建议梯度降温后还是再负80过夜后再放入液氮罐中，因为细胞适应低温需要一段时间
) X  e/ y' C7 p$ O  Q有冻存盒话话可以大大节省时间，冻存盒应该也不贵，几百块钱
. W, m& U! f: S7 H0 T2 P; A至于说冻存管温度达到负80就直接放液氮罐，还没试过

山羊

梯度冻存放-80°4个小时就可以了，实验室有师兄就这么做的，也没啥问题

279042256

我们是上午-80，下午快下班液氮，下午-80，晚上液氮保存，也就4-5个小时

yyshpy

对于大多数细胞应该是可以的

wdx0502

同意huangcong1988 的观点：方法选择由细胞而异，其实我没拿到一种细胞（陌生的）会实施对比不同的方法：包括冻存，冻存后存活率等。
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houbara

过夜是为了好安排工作，-80 放4小时就可以。