求助 大鼠骨髓细胞形态

天山飞鹤

回复 cneagle66 的帖子
6 b8 Z( E" {7 i& i+ b' h: L  y: V  b& l
是从相差显微镜的目镜里拍的，不过图片没拍好，还望多包涵、能不吝赐教

cneagle66

, q1 |/ k. G3 w# F# U1 D; j/ u( X* i. o( K; c  o1 d: f  s
难怪了，目镜直接拍摄的啊。
7 q  ~4 k4 a( c9 D全骨髓贴壁培养，第一次换液不需要那么长时间。有篇英文文章，在JoEV这个杂志上，其方法是将全骨髓铁臂3-4小时，就换液，传个三四代，MSC就比较纯了。实际实验中你可以自己观察，如果有很多贴壁的细胞出现后，及早换液，死细胞对生长影响很大。

shuangreny

培养原代贴壁细胞不是把上清弃掉后留下贴壁的细胞，不急于传代么？等长到贴壁80%以上才第一次传代么？那么早传代是考虑除去混杂细胞么？不需要这么早吧？

zarecol

回复 天山飞鹤 的帖子2 j* \# X& M1 M7 X

8 v) M) `+ T/ `- i3 n' a' O你原代培养了多久？48小时哪能长的出来呢？

cneagle66

第一次换液的目的就是要把不贴壁的细胞去掉，让已经贴壁的细胞继续生长，至于长到融合度多少再去消化传代，我没有太多经验，这个需要你自己去摸索，我想70%-90%都可以吧。

759512199

回复 天山飞鹤 的帖子
, H+ U, |2 H+ Q# F; T; O
# w" P, q. K) _: I7 n3 m理论上说血细胞基本上不贴壁，但是实验过程中放的久了还是会有好多血细胞贴到壁上。我刚开始做也是看其他文献2两天后换液，也可以得到BMSC，但是得到的BMSC数量上和增殖能力都不如第二天换液的好。: U7 P: Q' l* U. y+ `  d) ~
至于BMSC的数量在骨髓中所占的比例本来就小，差不多是万分之一到十万分之一，只要瓶中有BMSC贴壁，很快就会长出克隆斑。