关于组织切片中GFP的检测

dianying

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" c9 [' z0 m  `& K4 N: J/ J0 {1 w) {
* N4 Q# n5 {2 n Try 10x Citrate Buffer pH 6.0

goodboy

GFP蛋白荧光是要在其非变性时才能显现出来的，经过甲醛变形之后肯定不会有荧光。所以你应该做石蜡切片

zxcv12345

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6 h  o& L# l6 R; k0 w0 J% z: _
* j9 J3 J# d4 M+ u7 r% y我用甲醛固定细胞系，GFP没有问题。没做过冰冻切片。你可能的原因是可能固定时间过长。减少固定时间看看，做个时间梯度，看看在那个时间段GFP信号丢失。
, @* E( H9 V* I荧光镜下可看到银光，应不是蛋白降解
( N( n5 J  z- }" z乙醇、丙酮不能固定GFP表达蛋白。

namulow

请问：骨组织切片的话，如何才能更好的检测GFP? 冰冻切片还是石蜡切片？是不是比软组织切片更难一些？