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楼主: Sarge
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[讨论] Ficoll与羟乙基淀粉分离单个核细胞区别   [复制链接]

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发表于 2011-12-27 17:05 |只看该作者
娥的实验结果与“两种方法比较”那个文献一致。羟乙基淀粉法在原代细胞得率和原代增殖效率上有显著优势。3 z5 W6 }- }  w- T: D3 q# _# ?1 F4 C
红细胞沉降后剔除的挺好的。剩余一些红细胞不必再裂红,铺板接种就好了。
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发表于 2012-2-9 13:29 |只看该作者
请问楼主淋巴细胞分离液用的是哪家的?

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发表于 2012-2-10 09:10 |只看该作者
1. 先将羟乙基淀粉或甲基纤维素加入稀释血混匀后静置半小时,沉降红细胞,吸取上层细胞。. W4 e* E& s8 z" D/ X
2. 离心后获得有核细胞,再用PBS重悬稀释。
& l3 c" b' {( Y, g) M! X3. Ficoll法常规操作。7 {- y) T$ T0 l) r6 S9 L

# E. }) D: r* _0 ~* }" bps:此法适用于脐血中提取单个核细胞,因为脐血中红细胞数量较大,只用ficoll分离得到的单个核细胞含有红细胞较大,纯度不高;而外周血中红细胞较少,提取单个核细胞可以只用ficoll常规方法。
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发表于 2012-2-15 14:07 |只看该作者
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羟乙基淀粉分出来细胞量大,回收率高些,红细胞含量高;Ficoll分出来的细胞量少点,进口的Ficoll分的好的话回收率会接近HES,且红细胞含量很少。0 n; g, n7 S6 S
Ficoll操作麻烦些
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发表于 2012-2-15 14:53 |只看该作者
当然用FICOLL 分离才能分出相对较纯的单个核细胞,而用羟乙基淀粉只是去除部分红细胞,残留的红细胞会很多。
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发表于 2012-2-15 23:57 |只看该作者
可以先用羟乙基淀粉分离,再ficoll,同学做过,效果很好
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发表于 2013-3-20 13:35 |只看该作者
两种分离脐血间充质干细胞的方法比较。

两种分离脐血间充质干细胞的方法比较_高杨.pdf

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发表于 2013-3-22 14:20 |只看该作者
羟乙基淀粉是用于富集白细胞用的,剔除大部分的红细胞。. b. Y0 ]; ^: U; n5 @7 Q" I
Ficoll法分离出来的是单个核细胞,所说的回收率低是因为粒细胞已经离心到ficoll下方了,这种方法适合用于细胞培养。
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发表于 2013-3-24 13:02 |只看该作者
我就是用FICOLL提取的,偶尔会有出现有红细胞的情况,有人说宁可少吸取点FICOLL层的液体也不要去裂解,会得不偿失,大家认为呢
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发表于 2013-3-24 13:25 |只看该作者
两种方法都用过,也先HES再FICOLL分过细胞。个人意见:1、要看目的细胞的娇贵程度、承受处理的能力如何,注重时间还是细胞纯度;2、HES法分的细胞红细胞总是很多;3、FICOLL法分离的细胞中血小板相对较多,但红细胞大大减少;4、两种方法联合应用,有点耗时间,细胞离体时间过长,后续培养状态不好~, e. z5 z" N  a7 l" |. L
仅供参考交流~
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