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楼主: sannia
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[请教] 请教用MTT方法测过细胞proliferation的高手们   [复制链接]

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发表于 2011-6-30 22:13 |只看该作者
多谢提醒!回头做了再来汇报结果。

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发表于 2011-7-1 11:02 |只看该作者
1. 用96孔板做实验,一般每个样品要测几个孔,还是一整版一个样品?
. u6 o' q6 K5 @' d: u   每个样品做几个复孔,这个得看你同时做几个样品有没有标准品进行对照,MTT法影响因素比较多,所以说越多复孔,你的实验结果就越可信。除去四周的边缘效应,尽量做多复孔就可以。
& Q3 v/ x! g8 d; P3 `) h2. 加SDS-HCl 时要把贴壁细胞也吹起来吗?还有这一步的37度温育时间一般多少小时为好?9 S. ~" n# U( o
首先是你MTT如何吸出,可以将细胞板倒放于吸水纸上,这样可以防止细胞密度比较大的细胞整体脱落,影响实验结果。加入SDS-HCL后可放于摇床上振荡,使二者充分结合( \& m8 W3 V8 O. g4 O( e
3. 测出来的吸光值怎么对应到细胞个数,自己要先做个直线先?; P# V1 c; Y2 u; Z  d/ G
OD值不能够对应到细胞个数,只能说OD值高细胞存活较多,OD值低细胞存活较少,以此来做出相应的曲线。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-7-8 10:17 |只看该作者
回复 linchee 的帖子' g1 V) l9 q; o! {

6 o, N6 w" n2 T4 o我也想说是DMSO啊。
0 d5 v9 o. y: F- K+ g还是CCK8方便,生成的东西是可溶的
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