求助：骨髓间充质干细胞脂肪诱导分化？

clairezy1983

这才发现7楼的回复搞错了

Learner

回复 impingfan 的帖子# Q" W, W$ s& ~$ Z" p

' E" |- v; P) u! t/ j可以配制4%的PFA（多聚甲醛）溶液，用PBS溶解后等于10%的福尔马林溶液。配制时将含PFA的PBS溶液放到到70度的水浴箱里面，中间要不断的晃动摇匀直到彻底溶解，用一点氢氧化钠溶液将pH调到7.4，分装到离心管冻存。PFA在室温下长期保存有一部分会发生异构化变成甲醇。

impingfan

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8 w0 u; f7 @& V4 B1 `6 Z  j) M# R+ d( {) P! P3 j2 {; l, L
你好，用4%的多聚甲醛固定不会溶解脂肪滴吧？你用这个试过吗？

Learner

回复 impingfan 的帖子# R1 n! ?. B/ g
: F8 Y8 N, h" B/ T* p2 V
不会。我还没染呢，据说乙醇固定会溶解脂滴。而且在换液操作时尽量轻柔些别把脂滴弄破了。

impingfan

回复 Learner 的帖子  N3 X, k' g+ a( C" t6 W

- J1 n$ \" o! P4 L0 r呵呵，用乙醇绝对不行~~我深受其害！

stefan

     真是谢谢大家的指点啊！前一段时间出差实验暂时停了一段时间，现在又的加紧时间做了。我准备按大家的建议做做看看！* y0 D1 G$ C9 b
     这里还想请较一下：大家做诱导分化用不用细胞爬片啊？还是直接在培养板里诱导，然后在板子里固定染色呢？？2 s4 e2 |+ E# j+ W1 }
      其实前一段时间做的诱导，我自己在光镜 下看感觉是有脂肪滴出现，但是染色后没看见典型的染色图片，真不知道原因？也许操作有问题？下次做了向大家汇报吧！！谢谢大家！" X4 }5 c+ v% b4 P! n. r