原代脐带MSCs培养，胶原酶消化20cm能获得多少细胞？

1301918986

我想问问你们的消化液胶原酶是几型的，是和胰酶联合使用吗，比例是多少？

death0270

如果是单纯的去血管后切小块消化，那么消化时间要延长才行，一般是消化过夜吧。

yanmin

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6 _9 x* J8 }# g+ W; V# \( q
* g4 }3 v8 r5 k7 N1 `: v请问你们做组织块贴壁，我有几个问题想请教一下
4 a4 \4 K$ B6 ~% E+ o' i1、贴壁的组织是剪得很碎吗？大概有多大？& k$ H4 T* f2 b8 M  f
2、你们组织块贴壁的时候组织块一直贴在瓶底，不会飘起来吗？3 v, P5 Q$ k4 q
3、组织剪碎后是不是先贴于瓶底，于37度放置一下，然后再加培养液？- V- q+ h+ I: j
4、初次加培养基大概加多少，是将组织刚刚没过就好吗？以T-25的瓶子为例~7 Z+ E; ]2 g! t1 l! u' D% }
5、一般你们做组织块贴壁都是用多大的瓶子？0 M- ?% ~0 r/ M, z8 Y
麻烦您帮我解决一下这些困惑，谢谢~~

金戈

ljj0558 发表于 2011-5-20 10:56
$ b" V7 k& Y* ^* M6 M计数啊 ，就是5x106/ml 接种的

% I$ g* q* I0 F5 o8 o这个密度？？？太高了吧？？？？

ljj0558

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: J5 T! x' c7 _0 H" R( U# I8 h% n% [
大部分都不是的  一点都不高

lyj-0017

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( {+ T4 [. ~3 y+ S  P# q9 G( b9 _$ X6 x# V
能否分享学习一下你们的酶消化方法和离心清洗过程？谢谢

lyj-0017

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; @& H2 Y: `* w5 s( }! K' _
8 X* f: o/ E0 N& s能否分享学习一下你们的酶消化方案和离心清洗过程？谢谢

yanxm920

酶消化法对细胞损伤大，影响细胞的活力，建议用组织块法，有效提高细胞的活力！

漾轩

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) o1 {( E% V' \9 n1 b, m# ]6 I  F: t% i- A6 t' z
0.125%浓度T75 3ml,室温消化3分钟，然后培养瓶清洗两遍，收集细胞悬液，离心去上清即可

yangyaping

原代培养细胞长到30%-40%就可以传代了，所以本来就不是很多，如果要多的话，建议传代培养