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楼主: mbpsky
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大家教我一下组织贴块法的秘诀吧?   [复制链接]

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发表于 2011-5-4 01:04 |只看该作者
采用倒扣法,将组织切成小块了,加入一点血清,不要先加培养基,翻转倒扣,在下面添加一点培养基,保证瓶内湿润作用。待一定时间后 ,在翻转过来,就好了
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发表于 2011-5-4 08:51 |只看该作者
将组织块剪碎,越小越好,用移液管将组织块平铺培养瓶底,翻转倒扣培养箱中,第二天添加培养基并将培养瓶翻转过来,1周内不能碰触培养瓶
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发表于 2011-5-4 11:06 |只看该作者
我觉得不铺胶的话,最好加培养基少一点儿,类似于悬滴培养,等到有细胞迁出后再添加培养基,这是关键!另外如果条件容许还是铺胶过夜最好。
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发表于 2011-5-4 11:34 |只看该作者
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组织培养的最简单的方法就是把组织块均匀的放置在培养瓶底,培养上5-10分钟,然后将培养瓶反过来培养上30-60分钟后在加培养液培养+ p; _2 B4 s6 H! @
开始的时候可以加一半的培养液,然后换液勤快点并且换液的时候用倾斜轻轻吸走和加入培养液; p& N4 i0 J) }! Q* J3 t
等组织开始游离细胞并且完成贴覆后可以正常培养液量正常培养
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发表于 2011-7-10 13:35 |只看该作者
我做过皮下脂肪的贴块法,物理剪碎至1mm*1mm的组织块,其实越小越好。我用小枪头吸取,贴在干净的培养皿底,再倒置于孵箱中,孵育2小时左右,基本贴得很牢固了。再加入培养基,切记小心,不要把刚贴上去的组织块冲下来,让后轻微晃动,再正置于孵箱中孵育一天,24小时后基本就有很多细胞爬出来了。视情况加培养基或者换液,拟或加一些三抗。
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