求胶原酶Ⅰ的配方？？

baiyunrui

写错了不好意思
( X6 w) N8 f6 w' S$ l" e我用是的过滤好的低糖的DMEM，没有加任何东西！

hehe100

  0.2% I型胶原酶的配制（使用浓度0.1%）
& z% R1 r$ U; B5 B1准备：预热的Alphar-MEM培养基、250 ml蓝盖瓶、滤器、20 ml注射器9 C8 O- J. T2 y
2过程：首先称取200 mg胶原酶粉末放到称量纸上，注意要带口罩，然后拿进细胞房，将粉末加到蓝盖瓶中，再加入100 ml预热的培养基，混匀。: t- I/ j4 L  r3 B$ U' P
         然后用注射器吸取溶液后用过滤器过滤到50 ml离心管中，用封口膜封好后贴上标签放到-20度，现用现拿。
8 _) t5 d0 [  d这个是我们医院的配方。

翅膀111

据说血清对胶原酶I没什么影响，但很多论文说法是血清中和胶原酶，然后离心去上清液，但也有人说血清对胶原酶没中和作用。所以我的做法是胶原酶消化后直接离心的。我开始用PBS配制，也能消化脂肪得到干细胞，但是感觉比用DMEM配制的效果差很多。可能基础培养基对细胞的保护作用比PBS效果好。

xiaoming210

最好是用无血清的培养基配置胶原酶，只要注意消化时间就不会对细胞活性有大的影响

天枰2012

可以直接用低糖DMEM溶解配制

晓哥

我都是用PBS来溶解胶原酶的，用起来没有问题。关键是要足量，否则消化能力会减少很多。

yxp

我们实验室用的是无血清的DMEM溶解胶原酶，浓度时0.075%，而后过0.22μm的滤膜灭菌，就可使用了

B1228

胶原酶I 配出来是 咖啡色的么？

相宜

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' l& T- B9 @7 d- e
; F  A) J* u% N1 c7 t% E5 i- @我想配0.1%浓度的I型胶原酶，要是10ml培养基应该放多少mg的I型胶原酶粉剂呢？

牙牙丫丫123

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7 z" L* E& V+ Q; {4 a
! N, r8 I) g0 Z4 j* M. W原则上是1ml等于1g，你要配0.1%的胶原酶10ml，也就是需要加10mg的胶原酶粉末