关于间充质干细胞传代过程中干性维持的问题

zhangl

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% m7 T1 G  E0 y. f8 W" m
有两个问题再次请教：
: f& Y- f' K* q1 s) N* w4 {9 [- k/ r1、你们的MSC的来源？8 M$ u8 V% {3 L' X
2、如果方便的话可以告诉两个生因子的产家或货号吗？你们不加FGF吗？, w- i) \9 I7 v. n& `- B
多谢

木木ly

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* x  ], H6 e9 z0 z/ U1 X( H( K6 o' t. W4 Y" Z4 r) `9 l
不好意思，加的，笔误，是bFGF 和EGF，都是pepro tech公司的

a7625935

我們實驗室會將L-DMEM調製PH7.2-7.4後加入FGF及EGF後再培養,會發現B6老鼠msc長的很好且生長速度加快

牙牙丫丫123

建议使用的酶较为柔和一点儿，或者在培养液中加入bFGF、EGF等生长因子，另外换成低糖培养液可能好一些

Learner

回复 木木ly 的帖子6 F! p+ g: b1 m( W

" \/ `/ h$ X- ]! _4 w, G太贵了！

zhangl

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% C: }) c" k: @  w4 i! b/ v) S7 s0 R% k' V7 W: p
能告诉你们加的因子的具体深度吗？

zhangl

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0 _4 ?( C$ \0 B4 `6 q" w! c( h' i3 g9 v* V6 ~; d  B% {2 j
能介绍一下你们所加因子的具体浓度吗？还有血清浓度？十分感谢！

骨道边

新手上路啊，请问一下大家，文献都是用α-MEM或者L-DMEM这两个有什么区别吗？我五一前就试用后者来养，今晚去换液的时候看的情况好像也没有贴壁生长的样子。求教，谢谢了

hygene

zhangl 发表于 2011-4-29 10:09 ' b) |3 Y( }8 T2 a
回复 a7625935 的帖子+ @3 o) Z, }' U% w1 s6 U: `5 p) x
+ B9 b% f& a0 Y; I( H# _# ^
能介绍一下你们所加因子的具体浓度吗？还有血清浓度？十分感谢！

. p  [0 y% }: _0 w+ N1 AbFGF、EGF都是10ng/mL，胎牛血清浓度10%

哇牛

我们实验室用的只用a-MEM培养液+胎牛血清，里面不添加任何bFGF、EGF，MSC已经传到了12代了
0 E$ s* a" C' t* v刚开始我用的培养液是DMEM/F12，但是老师说DMED/F12里面含有的一些成分在后期会促进细胞分化（具体哪些成分，我也不是很明白，只是看的FBS里有成分可以促进细胞分化）/ S( L3 k9 v! D- D% J5 W, O+ K
氢化可的松：血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化可的松  k3 j4 w) i- A
，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。
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