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楼主: zerollx
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慢病毒转染的原理及过程(个人理解,求解惑)   [复制链接]

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发表于 2012-10-12 20:44 |只看该作者
我们也用的293T,其他种类的细胞我也用过,不好,建议不要用,还有,你的思路很清晰,过程正确
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发表于 2014-1-11 20:09 |只看该作者
回复 shihuijunm 的帖子% U0 g6 W6 c2 ?! k7 i) s
5 I% ^1 m* C' f
The 293FT Cell Line, a derivative of the 293F Cell Line, stably and constitutively expresses the SV40 large T antigen from pCMVSPORT6TAg.neo and must be maintained in medium containing
- a+ Z# \! V2 m9 X7 NGeneticin. So it's different from the 293 T cell line.
0 d2 S( k/ @) x4 OBest regards!
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发表于 2014-1-11 20:16 |只看该作者
回复 greenjing 的帖子
! z" X' N6 T  X) v( K" I" P, l# B- f* V
There are so many factors  influncing your transduction efficiency:1. MOI too low; 2. Too much antibiotic used for  selection; 3. Cells harvested too soon after  transduction; 4. Gene of interest is toxic to cells; 5. Non-dividing cell type used etc.
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发表于 2014-5-14 19:57 |只看该作者
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7 Z) w0 B; ~5 S4 |- D& F
0 N8 M% |4 e+ ]5 f+ T, V好像看有的说F的意思就是fast,生长速度比293T快,它们两个都是整合了SV40大T抗原。具体的也不是很清楚。
% H& _  ?% K  ?4 dThe 293FT Cell Line is derived from the 293F Cell Line and stably
: l" V8 @1 s# f7 i$ Y* d4 oexpresses the SV40 large T antigen from the pCMVSPORT6TAg.neo plasmid.! o. |+ Y6 \! q8 w
Expression of the SV40 large T antigen is controlled by the human cytomegalovirus7 M* e* o0 e' B6 @; R
(CMV) promoter and is high-level and constitutive. Studies have demonstrated maximal virus production in human 293 cells expressing SV40 large T antigen (Naldini et al., 1996), making the 293FT Cell Line a particularly suitable host for generating lentiviral constructs using the ViraPower Lentiviral Expression System available from Invitrogen.8 {9 o$ S2 z2 _+ w) ]& H5 M; V0 z
The 293 Cell Line is a permanent line established from primary embryonal human+ b: g! H# L7 U, m
kidney transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA (Graham et al.,8 Y) X% M' ^" E8 T' m
1977; Harrison et al., 1977). The E1A adenovirus gene is expressed in these cells" V& [2 [% ?, J3 o& I+ l# T/ [
and participates in transactivation of some viral promoters, allowing these cells to
2 t  [# r  S6 |% ~produce very high levels of protein.
, Q$ U  ^9 X4 A2 \The 293-F Cell Line available from Invitrogen (Catalog no. 11625) is a fastgrowing
1 ^1 X, o/ A6 Uvariant of the 293 cell line, and was originally obtained from Robert Horlick at Pharmacopeia.
1 ]9 Z' {) \. y这个以供参考!
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发表于 2014-6-16 12:46 |只看该作者
不错。
, X1 {; ?. j, }/ I- E

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发表于 2014-8-14 13:57 |只看该作者
如果不包装病毒,直接用脂质体2000转染目的细胞,比如MEF,结果会怎样呢?目的基本是不是也能转染到MEF中去?
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小小研究员

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发表于 2014-8-15 08:29 |只看该作者
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  r7 {" {- o7 u3 K% F$ j3 z. T" ?& u! l! w# n8 Z
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发表于 2017-5-31 12:35 |只看该作者
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发表于 2017-5-31 12:35 |只看该作者
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发表于 2017-8-6 19:21 |只看该作者
实用,多谢
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