分选肿瘤干细胞到底是用流式还是磁珠好？

caipan1982

两者皆可，荧光和磁珠都会随着传代而消失，相对来说磁珠影响小。; m6 k. J" F" Z# }% {, V* ^6 ?! Q
而且流式耗时确实太长，所以用流式的话建议将细胞的浓度调高一点，这样分选的时间会短一些，否则对细胞的活力影响太大。
4 S- `$ T/ k  P 而MACS速度快，效果能保证，其缺点就是太贵。现在用的最多的就是miltiney，用它的产品不仅仅是买磁珠就算了，你还得买分选器，分选柱，即使做活动期间这个一下来你就得花个2万了了。    分选注还是一次性的，用完还得买。     所以有钱的话可以选磁珠分选0 w; \. d1 K6 g. {! U: ^9 j

4 p4 e8 U) U( c! l资金不充裕的话，用流式算了。影响不是那么吓人，以前都是用流式分选的。

jamquit

xiaoma402716390 发表于 2010-12-13 13:48 ! c( r9 ]: @& ^' o3 T; Z( t  p
用磁珠分选后干细胞可以继续培养，就是磁珠有点贵75%折后还要九千多，好像现在搞活动买磁珠分选柱，还有生长 ...

4 r7 }) C; b7 E( G& x: C
对呀 我就是问的美天旎的代理 我准备做的就是肝癌的CD133 请问你说的分选成功了是指用的磁珠么？

jamquit

回复 caipan1982 的帖子* _1 ?* u+ f/ [5 z2 ?

" d: O7 Q: h  q感谢回答~~去给老板汇报下。。。用流式的话只要提高细胞浓度就行了么？还有其他需要注意的吗？

hanchao

回复 jamquit 的帖子3 [& Z! \* O: S) N+ M
3 C' x1 S8 I* m2 y6 z
恩，得多次摸索流式分选的操作参数吧。如果有高手帮你做，应该还可以。

jamquit

回复 hanchao 的帖子1 W: S& f  p% f, L8 X; c% N

$ `- `, n4 n% p, z( N谢谢解答~~~~

cell-therapy

可以使用Dynabeads，挪威Dynal的磁珠。不需要过柱子、不需要离心。呵呵，做个广告。。。( |! N9 G$ v3 [( s9 w5 Y0 z" Y3 ]

3 C! r5 {; C( s: M# K( B分选CD133，可以单独购买高质量的的BD抗体（生物素标记），然后与Flowcomp磁珠结合，分选出来后，可以将磁珠与细胞解离开，用于培养、流式检测，想干嘛干嘛。
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磁架可以借用，买的话也就3K多，磁珠3K多，抗体3K多。如果搞定磁架的话，总体7k左右可以完事儿。+ H" [- X0 b8 F/ ]. |
7 D- o3 @+ |/ X2 I* ~3 K) y
多看看文献，多问问师兄，多跟老板撒娇要点儿钱。
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jamquit

回复 cell-therapy 的帖子
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6 q% I3 _  Y3 Y噗 谢谢解答 找过老板了 决定用两个marker 偏向流式了

cell-therapy

回复 jamquit 的帖子7 t$ n3 I' p' c3 M8 U6 @% ^" l
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好啊，期待你使用后能上来分享你的经验。

jamquit

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恩恩 一定 希望实验顺利。。。