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楼主: xfyang2007123
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求助,原代神经干细胞的具体步骤。 [复制链接]

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发表于 2010-7-29 08:43 |只看该作者
回复 10# huangfei2010 [/b了。看文献上胎鼠多是在解剖显微镜下取组织,不用显微镜的话估计就很难分出是那一部分
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发表于 2010-7-29 13:22 |只看该作者
以下建议,仅供参考:
; r8 k+ [: {) x' o- q* y* D1。关于小血管:建议取材时一定要在显微镜底下仔细将脑膜和血管剔除干净8 g% j% o* a2 C5 r: p) U7 i+ N, I
2。关于组织片:建议用200目细胞筛过滤。也可用200目,400目双重过滤。/ r" e* Z( u0 M! n: B
3。传代换液建议半量换液,据文献报道全量换液易致分化。
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发表于 2010-7-30 08:26 |只看该作者
回复 12# SVZ 6 ], ^/ K+ h# W/ L
现在知道为什么半量换液了,原以为是怕细胞环境改变太快,适应不了呢。谢谢了。

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发表于 2010-8-2 11:04 |只看该作者
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回复 10# huangfei2010 " A  ]$ v4 p, Z6 N. ~$ J  a

9 o. H5 W* H, s% H; q) B' ?; O; j. f- R, T; U& j' y% b
    是可以分清楚间脑一些东西的,16d的海马都可以看清楚的。我用14d的,只取了大脑皮层,中间的一些东西都去掉了。2 X1 K# p1 ^8 v5 g5 E
胎鼠脑比较软,解剖时要耐心,慢慢来,否则就一片模糊了……
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发表于 2010-9-20 21:47 |只看该作者
回复 10# huangfei2010 ( _6 x  D9 z& F# h  S

" s) G  _" q' ?/ u* |' e4 f% E; ]
    16d的大鼠胎脑的海马是可以看到的,也可以分离出来,我用肉眼分的,其他的部分我就看不很清楚,但是海马是可以看到的,而且小心取也能分得很完整。14、15d的胎脑,去掉间脑等等,把皮层留下就可以了,呵呵宁缺勿滥,
6 U6 |; [. n# `/ o% o也有文献说把整个脑扔进去养NSCs的,不过只取14d胎鼠的皮层养,个人认为中脑内一些神经元会混入到你养的细胞里。
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