质粒扩增时，所用到的大肠杆菌培养基是购买的还是自行配制的啊？

xujie158

我们实验室LB液体和固体培养基都是自己配置的，方法很简单的，而且效果也很好！蛋白胨和酵母浸膏都是普博欣产的，NaCl是天津化学试剂厂的，Amp和kana是sigma的，感觉这些试剂要求都比较松吧，毕竟养细菌比养细胞容易得多，其条件要求也很宽泛！
4 g  v8 n- i( M     LB液体培养基：10g Trytone ，5g Yeast Extract，10gNaCl，调PH至7.2（也可省略），最后定至1000ml，高压121，20min灭菌，4度或室温保存就可以了。固体培养基的话，别的与液体培养基相同，只是在调好后加入15克琼脂粉（注意琼脂粉不溶，只有高压后才能溶解，所以需要分装的话，先分装后再加入琼脂粉），再定容至1000ml。
  T% o6 Z( k: w+ k    抗生素一般要求是50~100ug/ml，我们一般把都把其配成溶液，浓度100ug/ul，添加时是1ml培养基加入1ul抗生素！
% U; a* N+ A- E    固体培养基倒板前加入抗生素，温度不宜过高，一般50~60°为宜，太高温度会导致抗生素效价降低！我们高压灭菌锅带有自动保温功能，都是保温到50的。

bunny19870512

质粒扩增是指大量培养菌液(菌板)么?那就用普通LB嘛,配的很方便的,建议不要用膏状蛋白胨,会很不好称取的,NACL也不要太老,都成块了就不好了...混匀的时候磁力搅拌15min左右,溶液澄清时可以调节PH值,之后加上棉塞或滤膜高压就可以了..

yueyongheng

以前一直用自己配的，也用过生物公司的，是买酶增的产品。效果上看不出什么差异。

weiyepan

大量做肯定是自己配，小量做就买算了。