看看我的 小鼠iPS细胞经过 EB分化的问题（附图）

shewawa

回复 1# 上海过客
+ G* Z  `2 b$ |9 [' qEB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，' v  _: b* p# k+ i3 \
问题1：浓度不是很重要，iPS的好坏有关，我做过十个干细胞的分化也没失败。1000000也没失败，所以我觉得这个没有关系。
( U" E' Z7 t3 ]3 ~问题2：每天换液一次，换一半
3 h0 h* g4 j2 i1 G; Y问题3：DMEM FBS NEAA 2-M L-grutamin P/S具体浓度估计都是一样的，你找论文看就行了。0 u4 i5 M0 e* A
问题4：不清楚，估计是死了。实验室有人的EB也变成那样了，不过我没问为什么。) K/ s/ m: W) J* X4 b7 M: C# s
/ M/ W; `1 q. i- E
希望能帮到楼主。也希望有问题能和楼主讨论。: z1 F" p! D& @3 C6 X- ?! O6 ]/ i
请问你说的细胞跳动是怎么回事？是在做心肌细胞分化吗？

上海过客

回复  上海过客 7 V1 ^: j" ?! R* Z/ ^* i3 ?
EB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，8 F* g& M* ~$ X4 t
问题1： ...
) _0 W* C" P7 qshewawa 发表于 2010-6-28 00:46

7 {, S( d8 w& j: g0 M
$ z4 W* z1 M* e* V
! B* y9 @( p% G; i6 w
谢谢帮助 ，  是 做的 分化 ，但是不是做心肌分化，就是自由分化

cortex

回复 8# 上海过客   g* Z* ~- m0 k/ X. m1 D
5 U- T8 d) x* Z- [0 v

: q2 i1 V/ `+ ^! k  b+ U    我们一般是刚开始隔天加一倍培养基，（起始0.5ml）后面细胞长起来后隔天换液（1ml）。

yanyuanmm

小弟，你是换液的时候把中间的吹掉了吧

amazingt

我做EB都不换液的，拿60mm的平皿加足够的培养液，不换液一样可以形成EB。而且细胞密度无所谓了，多少都可以

juan880929

起始细胞密度最好是1000个细胞每滴，只要能够形成EB，细胞量尽量控制小一点，还有看看是不是饲养层没有去除干净

juan880929

好的EB中间应该有很多囊状空泡

pheebs

没有具体的protocol吗

rain2402

这个不是很清楚。学习学习

iytbxxg

我都想知道怎样做的