热点解读｜Claudin 18.2-下一个肿瘤免疫治疗 / 伴随诊断新热点

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热点解读｜Claudin 18.2-下一个肿瘤免疫治疗 / 伴随诊断新热点
* e' w/ h# X! L  i0 w+ v来源：Abcam 2020-11-24 15:451 J. G; s+ L) B! T. F+ m! j3 u. ^# O+ q
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数据表明全球 50% 的生物药研究项目集中在为数不多的热门靶点。各适应症中，PD-1/PD-L1 单药疗法也仅有不到 3 成的平均缓解率。因此，开发新靶点，并围绕新靶点的药物和诊断的开发是突破靶向治疗、肿瘤免疫治疗瓶颈的关键环节。
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& Y* w* w2 L  x研究显示Claudin 18.2 在多个癌组织中的表达呈高度选择性，以及在特定癌种如胃癌、胰腺癌等患者中呈高阳性率，使得围绕 Claudin 18.2 开发的靶向治疗、肿瘤免疫治疗具有较广的潜在获益人群和较低的毒性，因而该靶点引起了诸多国内外药企的关注。
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Claudins 是一类存在于上皮和内皮紧密连接中的整合素膜蛋白，是紧密连接的重要组成部分，1998年由 Shoichiro Tsukita 等发现。该家族有 24 个成员，具有 4 个跨膜结构域（见图1A），参与调控细胞旁通透性和电导1，2。人类 Claudin 18 基因有两个可供选择的 1 号外显子，因而产生 Claudin 18.1 和 Claudin 18.2 两种蛋白亚型（图1B），两者在第 1 个胞外结构域约 50 个氨基酸的序列上只有 7 个氨基酸残基的差异（图1C红框标注）3。
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! Z# R& x+ e* ~7 G, \8 {) e% d▲ 图1. Claudin 18 基因和 Claudin18 两个剪接变异体蛋白9 d" \7 T4 y0 h& _" F

. [, c5 X# u. d& e+ lA.Claudin 蛋白模型27 H) s0 g' Y, s  [3 Y: w! d

# F) _/ b6 K" M7 j! U* c0 }B.Claudin 18 基因组结构4( x" X! C  a! q6 }) ?& [  o6 ]% F

; R- i2 T1 |% d! u# U/ x- l$ G8 b2 ?C.Claudin 18 两个剪接变异体蛋白第 1 个胞外区蛋白序列跨种属比对3$ n6 c$ |! @; W& ]

3 o2 g& z: v. {/ \不同的 Claudin 蛋白在正常组织中的表达谱会有差异2。Claudin 18.1 只在正常肺脏中表达5，而 Claudin 18.2 特异地表达在分化的胃黏膜上皮细胞，但在胃干细胞区不表达4，多项研究指出Claudin 18.2 蛋白在其它正常组织中不表达4，6。& B) Z& s2 l7 d) c
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有意思的是，Claudin 18.2 蛋白在胃癌、胰腺导管腺癌、胰腺神经内分泌瘤、胰腺腺泡细胞癌、胆管癌、肺非小细胞腺癌、肺大细胞癌、食管腺癌、食管胃结合部腺癌和卵巢癌的部分患者中异常表达4，6-10，不同癌种 Claudin 18.2 阳性率见表1。  @; A. j" f: M% ?) o
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Claudin 18.2 在癌组织和正常组织的显着差异性可能源于 Claudin 18.2 启动子区域 CREB 结合位点在正常组织中 CpG 高度甲基化，而在正常细胞癌变过程中 CpG 甲基化水平降低，进而 CREB 参与激活 Claudin 18.2 的转录。4. f3 [* q# ]# t  P& e4 }

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# R5 |0 a; f0 T( f/ K; W7 {▲ 表1 不同癌种 Claudin 18.2 阳性率
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) |) P0 W7 w0 `4 p; |目前被批准进入临床试验的靶向 Claudin 18.2 疗法主要有三类：单克隆抗体、CAR-T 细胞和双特异性抗体（见表2）。
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▲ 表2 获批进行临床试验的靶向 Claudin 18.2 药物（截止至2020/9/15）. F3 c: g9 s7 d. h) E0 m9 {( M1 d
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*信息源自 www.cde.org.cn: O% ?  z9 n2 o- L  D
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www.chinadrugtrials.org.cn. n0 ^$ A( K$ d  {
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及药企公司官方网站: S$ _: l/ E! Z9 @; y) z& h8 N/ D

3 w" m0 `5 l9 a. F, gClaudin 18.2 单抗药 Zolbetuximab(IMAB362)# \! D! T; _7 s# m3 p. p% }: {" E% x' s

; F$ D. |' v: E8 I7 \  b5 H8 J在目前所有被批准进入临床试验的靶向 Claudin 18.2 药物中，研发进度最快的是Astellas 的 Zolbetuximab（IMAB362）。IMAB362 是一种特异靶向 Claudin 18.2 的人鼠嵌合 IgG1 单抗，其与肿瘤细胞 Claudin 18.2 第 1 个胞外区结合，通过抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC）来诱导肿瘤细胞死亡11。
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' O$ G. D' r, ^4 P9 q, L一项临床 IIa 期（MONO）试验评估了 IMAB362 作为单一疗法在≥50% 肿瘤细胞中等或强表达 Claudin 18.2 的晚期胃、胃食管交界处或食管腺癌患者中的安全性和有效性：共有 54 位患者入组，ORR 为 9%，SD 为 14%；对于≥70% 肿瘤细胞中等或强表达 Claudin 18.2 的患者，ORR 为14%，SD 为 17%，IMAB362 表现出较好的安全性，绝大部分的治疗相关的不良反应为小于四级，主要为恶心(61%)、呕吐(50%)和乏力(22%)12。
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8 p8 w- R/ E2 \9 @! U, p4 {在2016年 ASCO 会议上报道了 IMAB362 临床 IIb 期（FAST）试验的结果，该临床试验在 161 例患者中评估了 EOX（表柔比星、奥沙利铂、卡培他滨）联合或不联合 IMAB362治疗≥40% 肿瘤细胞中等或强表达 Claudin18.2 的晚期胃癌/胃食管结合部腺癌的疗效：与单一化疗相比，IMAB362 将平均 PFS 从 4.8 个月延长至 7.9 个月，中位 OS 从 8.4 个月延长到 13.2 个月；对于≥70% 肿瘤细胞中等或强表达 Claudin 18.2 的患者，EOX+IMAB362 的组合疗法中位 OS 是单纯 EOX 治疗近 2 倍（16.7vs9个月），而 3/4 级不良反应发生率并未显着增加，提示了 IMAB362 联合化疗一线治疗晚期胃/胃食管结合部腺癌具有较好的疗效和安全性13。目前，IMAB362 正在全球范围进行多项多中心双盲随机 III 期的临床试验。
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0 _# `0 {% I+ UClaudin18.2 CAR-T (CT041)) x7 ?" x+ `& H; j6 K8 s

6 A+ ^/ t5 z) s  o& D, h( OCAR-T 细胞疗法成功的关键是选择正确的靶点作为抗原，即理想的 CAR-T 靶点是应该只在肿瘤细胞表达，这样可以防止 CAR-T 错误地杀伤健康细胞引起不良反应。Claudin 18.2 因其表达模式的特殊性，是 CAR-T 治疗实体瘤具有巨大潜力的靶点。
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2019年科济生物公布了 Claudin18.2 CAR-T (CT041) 的单臂开放性临床 I 期结果：该试验入组了 12 例 Claudin 18.2 阳性的晚期胃腺癌或胰腺癌患者，给予其自体 Claudin18.2 CAR-T 细胞治疗，在 11 例可评估的患者中，完全缓解 1 例；部分缓解 3 例，病情稳定 5 例；疾病进展 2 例，总 ORR 为 33.3%，平均 PFS 130 天，未发生严重不良事件、治疗相关死亡或严重神经毒性事件14。
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目前 CT041 治疗 Claudin18.2 阳性的晚期胃腺癌或胰腺癌的多中心开放性临床 Ib 期临床试验正在开展15，今年8月，CT041 自体 CAR-T 细胞注射液用于治疗 CLDN18.2 阳性实体肿瘤的临床试验申请通过了 NMPA 药品审评中心的许可16。
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双特异性抗体6 U2 \& H* [; O4 J
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Claudin 18.2 双特异性抗体药物研发也喜讯不断。今年6月，Sparx Therapeutics 公司在 AACR-2020 年会上首次公布了Claudin 18.2/PD-L1 双抗 SPX-301（Abstract# 534）的临床前结果，该研究由 Sparx Therapeutics 公司和北京大学肿瘤医院寿成超教授课题组合作开展：动物实验结果表明，SPX-301 与单抗药物有类似的 PK 特征，能有效抑制稳定表达 Claudin 18.2 的 MC38 肿瘤生长，且免疫原性较低，安全性较好，目前该公司已经启动 SPX-301 的中试和安全性评价。5 x! l" V. y! U- d: u

  v& H) J; s3 P" t" u4 i. O  l' NAmgen®/百济神州共同研发的 Claudin 18.2/CD3 双抗 AMG910 在今年7月，获得 NMPA 的 IND 批复16，AMG910 在国外正在开展 70 位 Claudin 18.2 阳性胃癌患者的 I 期临床试验15。3 X9 y  S3 v. L) a; ]9 l& F2 F

$ G5 w) \2 x* [$ \1 Z# x) mAbcam 助力 Claudin18.2伴随诊断开发
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虽然抗 PD 疗法开启了人类治疗癌症的新纪元，但是单一的抗 PD 疗法并不是对所有类型的肿瘤都有效。如果肿瘤微环境中缺少肿瘤浸润淋巴细胞，即使是 PD-L1 阳性的肿瘤，单一的抗 PD 疗法不一定有效17，因此，针对新靶点的靶向治疗和肿瘤免疫治疗将会是已有的肿瘤治疗方法的重要补充，Claudin 18.2 因其特殊的表达模式以及与临床结果较好的相关性，将会是继 PD-L1 之后下一个伴随诊断（CDx）热点。4 ~' P7 u" Q+ v) C; ]" N

3 e& D2 n; B( ~目前，靶向 Claudin 18.2 单抗、双抗和 CAR-T 疗法均以组化筛查肿瘤 Claudin 18.2 阳性/高表达患者为基础。前述的多项临床试验结果提示靶向 Claudin 18.2 疗法对免疫组化检测（IHC） Claudin 18.2 阳性率更高的癌症患者亚群疗效更好12，13，但值得注意的是，Claudin 18.2 不仅在肿瘤中的表达因不同癌种、不同人种存在差异，还在同一肿瘤内呈现出异质性4，6-8，18，因此，通过精准地 IHC 筛查 Claudin18.2 表达，可以导向性的收纳临床入组群体，进而提高药物开发的成功率；在药物上市后，也可以指导治疗和用药，对于临床试验数据的可靠性以及精准医疗的有效性是至关重要的。
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鉴于该靶标蛋白的高度同源性（图1），IHC 应用的诊断级别抗体开发极具挑战。Abcam 提供 3 个 Claudin 18.2 或 Claudin 18 重组兔单克隆抗体（RabMAb®），见下表。
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5 v6 F0 p- f, c% @) S2 f其具有高特异性、高灵敏度和高批间稳定性等优势，其中ab222512在 Claudin 18.2 多项研究中已得以应用8，19（图2）。( e0 \7 d0 ?0 C7 g/ }) v- l8 a3 P7 T

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▲ 图2 ab222512 胃癌、正常胃组织、胃肠化生组织组化染色图19
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(a-l)不同胃癌类型的 Claudin18.2 表达 (m-p) 正常胃黏膜 Claudin18.2 表达- e. |1 ]" T3 I) \- ~
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(n) 胃肠化生组织. J' i6 _! u& ]" K, z6 d
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同时，Abcam 还可以针对药企/诊断公司个性化的需求，使用行业引领的兔杂交瘤抗体开发专利技术，为客户提供包括 Claudin 18.2 在内的各种抗体原料。20-223 I" W) `7 D" }+ {3 Q* d0 w

9 }. L3 O4 v  ^% a/ g7 @结语2 Y3 i8 u& g+ v" Y, ?; q

* c( V0 b8 p0 Z: R6 O: z  oAbcam 现拥有兔杂交瘤（Hybridoma）、B 细胞克隆（B-cell cloning）以及基于二代测序技术（NGS）的三大兔单克隆抗体（RabMab®）开发平台，全面契合药企/诊断公司的各种需求，例如诊断抗体（CDx）、抗体药物筛选及验证抗体（ADA/PK/PD）以及抗体药物前体发现（Drug candidate discovery）等。我们共同期待兔单抗技术继续发挥其独有的优势，创造新的辉煌。与您携手，共创未来。: z7 j  t$ i( U( c/ s' Z0 m

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