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楼主: missyoudad
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小鼠间充干相片,大家帮忙看看,似乎长得太快?   [复制链接]

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包包
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发表于 2010-4-27 10:58 |只看该作者
我还用全骨髓法做了次,感觉纯度差不多?有点郁闷。我查国内有文献说长到80%融合需要14天左右。我觉得这个数字相差太远了。
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发表于 2010-4-27 10:59 |只看该作者
至于传代消化,我询问了美国一位教授的意见,说小鼠的细胞贴壁会很牢,建议用胶原酶,消化2-3分钟

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发表于 2010-4-27 11:01 |只看该作者
本人因为实验室当时没有胶原酶,还是用0.25%的胰酶消化的,传第一次的时候,5分钟仍有很多细胞没消化下来,就延长时间至8分钟。但是感觉细胞破坏掉了。传代后养了两天,细胞还是圆形的。伤心。
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发表于 2010-4-27 11:05 |只看该作者
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血清用的是15%FCS,是不是高了点?血清浓度太高还是会诱导分化的吧?是不是可以改用10%的。用的是α-MEM。感觉国内的用DMEM-LG的比较多。
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发表于 2010-4-27 20:10 |只看该作者
一只小鼠的股骨就足够了,如果直接贴壁法的话。
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发表于 2010-4-28 17:42 |只看该作者
再传一到两代,直接做分化,看是否有三系分化,
& S4 o0 V  ^* {7 {1 ^/ D# Q长得快,说明你细胞状态非常好,如果三系做出来了,就可以直接用了,
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发表于 2010-4-29 00:02 |只看该作者
状态很好,加油

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发表于 2010-5-6 23:00 |只看该作者
谢谢大家

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发表于 2010-5-14 10:38 |只看该作者
你的细胞看着好羡慕呀!我们养的大鼠MSC快72小时了,看不出有什么变化呢!

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发表于 2010-5-14 23:30 |只看该作者
是原代的,可以看出不纯,我用全骨髓法,一般要一周才可以这样
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