关于脐带消化的问题

柏林小杨

回复 9# 157238360jwj
+ P0 d# c% X1 j. }  Y+ ~' T/ v
  v: x. I9 |6 D% g+ c8 y+ y7 n
) `2 M% V& \1 x" B" V    请问你们消化之后细胞悬液还粘稠吗？细胞得率能到多少？

西瓜太郎

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! a0 x/ ~) X; z' |8 o
& C4 C' M& {1 M7 |4 C你好，你的试验中提到“加入 4ml 的消化液（含 0.25%胰酶，200~400U
+ B3 G0 i: B, g胶原酶Ⅱ/ml的PBS 液） ，混匀，37℃中消化1 小时，每隔10 分钟振
# d, p, |; Q( a" r) a摇一次”。我想问一下，你的4ml消化液具体是怎么配置的？因为我是才做实验的，也许这个问题很简单，但是。。。( g$ K2 X0 K; B8 |+ z% t2 k  d& \
谢谢你赐教啊

wuxiao101325

回复 西瓜太郎 的帖子7 Z, W4 R6 q  x  c9 I& j3 E4 c

+ Y' b0 Z/ F& a  h2 |分别用PBS配置2*的胰酶及胶原酶，用时等体积混合即可

西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子. J* y% H! z  v; W
0 I- c1 }) S: G- |) R2 L/ h9 X
就是4ml=0.25%的胰酶2ml+200/400U 胶原酶II 2ml？是么 ？" W! k  v2 H$ [% C

文武庙

好东东，mark一下！

清影

最近做脐带间充质干细胞收率不高，而且细胞很杂，原代贴壁不好。各位有没有做的比较成熟的哈，指导一下。

wuxiao101325

回复 西瓜太郎 的帖子) n( U" ]0 t- t8 h- d" a4 Z
) d3 F& v( F: E! w
0.5%胰酶2ml+400~800U/ml胶原酶2ml

西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子, H& O% J' ]# w/ `

  o! H" [" z, I' z* r! o5 l4 将含组织块的消化液，转移到25cm2细胞培养瓶中，加入DMEM/F12(Gibco,cat no 12400-024)培养基（含15%胎牛血清Gibco, Ref 10099-141），37℃、5%CO2孵箱培养； 7 h8 C. h& I: E! u( R7 [8 s
弱弱的问下，你的组织块怎么从培养瓶中去除啊？

sign_huhu

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' W7 q* J" F  E! B, ]/ a7 I2 {& L7 T, K
你可以把移液管掰断 用大口吸 ! }8 t* q  z* R2 `, F- h

xuehu20

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& R- |2 y4 B  L8 J9 \. ^
/ u( K* ~, j* m6 Z: Y5 `把移液管细头一侧掰断，酒精灯前灼烧使管口圆润，然后吸取组织块，第一次换液要轻柔点，等细胞长出来后就可以拍打培养瓶，把剩余组织块去除了