大家谈谈你们是怎么培养ES细胞的？

旺旺

我也是每天换液，基本固定时间，

jldbb

ES细胞每天换液，
3 F2 A) g4 _1 K0 f9 M. V" [& ]) p4 JMEF如果是做FEEDER用的，照射过，没有必要换吧

have-a-rest

ES不同于其他细胞，要好生伺候才会有好的结果。换液看情况了，刚传代可以隔天换液，后期生长快，需要每天换液，而且要增加培养基的量。消化吗，时间和酶的浓度、细胞的状态密切相关，不可一概而论，要看情况灵活掌握运用。

blue11sea

我也培养ES细胞，每天换液较好，胰酶用0.05%，不用固定的消化时间，

starlight

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我主要在养mESC，消化的控制其实看胰蛋白酶的效价，我们消化用的是0.125%的胰酶，消化时间大约2-3分钟就够，消化的时候如果轻晃瓶底消化液，使细胞充分接触消化液，有助于提高消化速度，但不能晃得过猛，克隆内细胞边界清楚但整个克隆没有浮起就可以中和了；1 P! N7 S/ ~/ A$ ]% O, q; y, o" [* y: G
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换液是看传代之后细胞状态，如果传代后细胞浮起较多，第二天需换液；不过我们实验室也有人传代第二天总换液的，这样可能对细胞是最好的；

jsy

我觉得消化时间是由胰酶浓度来定的，0.25%胰酶消化MES时2到三分钟即可，可以在镜子下看是否大部分已经脱落，而且可以敲打侧壁加速脱落。实验细节完全可以根据实际情况来作调整。