干细胞“等级”之争：再谈Stem Cell，ABCG2和Side population.

xyzengh

应细胞海洋超版之邀，荣幸地成为该版版主，深恐自己难以胜任，且近段时间琐事缠身，根本无暇分身来版上跟各位战友交流学习，深感愧疚。于是抽出在实验空闲之际，开辟这个话题与战友们共同探讨，希望各位高手们不吝赐教，多多支持，呵呵！
% e/ W3 I) }4 B    干细胞从它兴起之时，就充满了各种争议之声，而它就是在这些不绝于耳的争议之声中吸引了越来越多的眼球和注意，使得各个领域顶尖级高手前赴后继地投身于它的怀抱当中，百花齐放，各领风骚！
6 i0 L, d, V0 j8 Q    其中一个颇有意思的话题就是：干细胞们到底是一群等级地位相同的群体，还是里面依然存在着所谓的等级制度，即王中之王，干细胞中的“干细胞”呢？！) r9 ^# q) D/ ?! N. n
    带着这个问题，我们回顾以往那些大牛们的杰作吧。早在1996年，哈佛的Goodell就在小鼠的骨髓造血干细胞发现一群难以被Hoechst33342染色的细胞亚群，经相关检测，发现这个亚群的细胞相比于别的HSC而言，具有更强的pluripotency和造血reconsititution ability，因此她称这个亚群的细胞为side population，这个研究成果发在JEM上，引起了巨大的轰动效应。2001年,华人学者Zhou. S在Nat. Medicine上首次证实了"SP"亚群细胞对于Hoechst拒染是由于耐药基因abcg2（ATP Binding Cassete G Superfamily member 2)的作用，abcg2成为分选确定SP的一个显著标志，从此有关干细胞SP的研究进入了一个如火如荼的阶段，人们不断在不同的正常组织（心、肝、肠、血液、甲状腺、视网膜等）以及肿瘤细胞（白血病、肺癌、乳腺癌、肝癌等）中发现SP的存在，使得SP在Stem Cells领域越推越广。可同时对其质疑的声音也不绝于耳，比如abcg2同样在滋养层细胞表达，可却不是所谓的SP；SP最早是在骨髓中的HSC中发现，后面证实外周血来源的HSC中一样存在，可最近Cell Stem Cell的一篇文章就指出，脐血来源的HSC中就不存在SP；另外，abcg2在小鼠骨髓或外周血的HSC中表达与Hoechst拒染直接相关，可是其在ES细胞中的表达确与其无关。。。Why？！
% x& F% [- H1 [- B/ m/ e' c    去年在Plos One上的一篇文章证实abcg2在小鼠的ES中参与卟啉代谢而通过对Nanog的调控维持ES细胞的pluripotency,同年BBA上一个欧洲的group报道ABCG2 同样也在human ES 细胞中表达（HuES cell lines)而且与其的plripotency相关，可我们根据我们的大量实验数据表明ABCG2 并不存在于未分化的human ES/iPS 细胞中，而出现在当它出现自发分化，或定向诱导分化成滋养层细胞或神经干/祖细胞的的时候，因此，有关SP的“定律”并不适用于human的ES/iPS细胞中。有趣的事，我们如果在human ES中通过慢病毒系统强行表达ABCG2的话，hES将可以在撤去bFGF的条件下维持更长的pluripotency stage,进一步实验证实这是通过激活AKT途径实现的。- b( J5 F* l: x+ g1 D) k' r
    所以由此可见，在干细胞领域似乎没有绝对的真理可言，也没有放之四海皆准的金科玉律。1.不是所有的干细胞都有所谓的SP的；2.不同的干细胞它所需要的染料浓度和染色时间都需要一一去摸索的，其中一个很重要的因素就是细胞中ABCG2/abcg2等ABC transporter superfamily members的表达高低，比如针对小鼠骨髓干细胞分选的protocol,但不代表一样就可以用于别的所有细胞。3.能够拒染Hoechst染料的不一定就是所谓的SP，同样种类的细胞在不同发育阶段对Hoechst的拒染情况也不一样，在网上搜搜可以发现相关文章，我相信不久的将来你还会发现更多的文章。

zpzp0312

楼主总结的不错！# B6 C0 F( E# l5 R' I6 j
佩服！