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DC培养问题 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2017-8-4 09:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
用国产DC因子套装培养DC,先从外周血中分离获取PBMC,短暂贴壁培养2h后加含因子培养基10ml培养,第三天补加5ml培养基,不进行半量换液,第六天加促成熟因子,第7/8天收细胞,皿底会出现很多贴壁的,用0.05%胰酶都消化不下来,那这些仍然贴壁性很强的细胞是什么细胞
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沙发
发表于 2017-8-4 10:35 |只看该作者
是不是未成熟的DC和T细胞呢?建议做流式检测一下
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藤椅
发表于 2017-8-4 11:29 |只看该作者
您的国产DC因子套装是哪家的?
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板凳
发表于 2017-8-4 14:10 |只看该作者
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7 8天DC 细胞自己就飘起来了,不用消化呀
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报纸
发表于 2017-8-4 17:30 |只看该作者
本帖最后由 免疫与细胞 于 2017-8-4 17:33 编辑
) l, R/ k% C  {+ _, e" l7 X4 T* k& _- S  y5 l9 S9 t, _0 k
外周血来源是正常人的吗?不过你不用担心,这些细胞应该不是你要的。何况只要DC细胞量够就可以。
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地板
发表于 2017-8-7 14:24 |只看该作者
估计是DC尚未成熟,贴壁是很难吹起来的;如果DC细胞成熟的话,是会飘起来的!
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金话筒 优秀会员

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发表于 2017-8-9 09:17 |只看该作者
回复 dahui 的帖子! f, x0 [  l+ u9 J! H6 d

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金话筒 优秀会员

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发表于 2017-8-9 09:21 |只看该作者
一般只需要促熟一两天,促熟两天后还是下不来,操作流程上建议用胰酶或细胞刮刀处理,但是贴壁贴太紧了,胰酶消化还是会有很多下不来,另外部分贴壁细胞是可以看到那种较典型的树突结构的,大部分没有或者不典型
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