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楼主: lybai
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[讨论] 外周血单个核细胞分离完有红细胞   [复制链接]

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发表于 2017-4-11 11:38 |只看该作者
一般2000R,30分钟出来结果相对较好,但是有时候吸取的时候没有操作好还是会导致红细胞出现的。
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发表于 2017-4-13 08:37 |只看该作者
谢谢提供经验!

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发表于 2017-4-21 12:02 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2017-4-27 21:11 编辑
/ X7 Y8 a! ^% {  R  f: v) O- s
+ y5 ~* U+ y8 T) R$ W& N回复 lybai 的帖子: [+ t9 j5 h, t

- x5 Q* |! H0 Z1 i9 W9 E4 |6 ^首先,活细胞是在所难免的。只是细胞多少的差别3 V' ?  I9 B  w( T
其实,如果分离的效果差,你可以试一试用15ml的离心管,这样虽然添加的时间长,但是分离出的效果比50ml离心管的效果好。& {' d/ V/ X' B% K
最后,如果觉得还是比较多的话,可以试一试红细胞裂解液,或者用高渗和低渗液对红细胞进行裂解。但是得把握好裂解时间。" a- r  H: K8 `; ^6 H! G

  N0 r$ X8 Q& v
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发表于 2017-4-22 11:17 |只看该作者
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有时候会有一点红细胞,不过不影响后期培养。有些资料说初生有核红细胞可能和PBMC密度相同,分离时会混在一起。建议:1血液不要放太久,如发生溶血这种情况会很容易出现。2 离心降速设0 。3 分离液常温下使用,不要从冰箱拿出来就使用
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发表于 2017-4-24 11:06 |只看该作者
离心完肯定会有一定量的红细胞存在的。你可以用红细胞裂解液处理一下后再培养。但是不建议用红细胞裂解液。因为红细胞裂解液处理后还是会有少量红细胞存在,而且红细胞裂解液对其他细胞也是有一定伤害的。以前我们做过对比实验,红细胞裂解液裂解过后的细胞状态明显比不用裂解液的差。
7 `, M4 Q9 @& u3 ~建议降低细胞接种密度。红细胞会影响单个核细胞的贴壁,降低接种密度可以减少红细胞的影响。由于红细胞没有核,所以2-3天后就会自动裂解,而且红细胞不贴壁,可以通过后期换液完全去除。
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发表于 2017-4-28 14:24 |只看该作者
红细胞很正常的,跟血的质量有关系,一般离心刹车最低,血样没问题的话出来都是很好的
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发表于 2017-5-8 16:01 |只看该作者
我想问一下,沉淀有红细胞会影响贴壁吗
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发表于 2017-9-26 15:00 |只看该作者
分离液多一些,误吸的红细胞肯定会少一些,但仔细一点影响应该不大,主要是可以后期用生理盐水之类的去裂解一下
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