NK细胞培养过程中，用血清代替血浆有关系吗？

免疫与细胞

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! Z$ o% Y3 \! J2 B' O0 A
9 i; l* Y) x0 G7 K& ~看了你的回复，我感觉最大的问题是你提取完PBMC，直接就冻存了。你怎么保证冻存后细胞活性，又是怎么操作的。问题最大是在这里

爱学习的青年

回复 免疫与细胞 的帖子/ ~! L$ T4 d  j, ^( A9 X( S

  [' ]& ~! M" o5 l) H7 b  [1 G# u就是因为有好几个地方感觉不如意的，所以想请教一下，不然无法排除，如果血清可以替代血浆，那应该就是冻存单核细胞的问题，感谢大家

shy-shen

这有可能就是血清的问题，有的血清确实挺差的，培养肿瘤细胞还可以，对免疫细胞作用不大。

地球外世界

回复 浅浅的花花 的帖子% M! z1 S& w2 s

; T# i6 D1 Y( ?- I8 _/ W. Q血浆主要提供哪些营养物质？

gondobar

回复 爱学习的青年 的帖子# B- h8 E0 y& W) [" A2 M
6 a7 A( i# g& n9 v% e# g" q
NK细胞比例很低，冻存后扩增比较困难，但并不是养不起来。方法和血清没问题的前提下，前期可以加高血清比例。

cellprobe

不管是动物的还是自体的，血清都要灭活的。如果用于临床，不能用动物血清。其实制备NK，可以完全不用血清，光加细胞因子就足够了。你应该你从其他方面改进工艺，比如NK细胞培养密度，细胞因子的浓度和种类是最关键的，一般开始还要CD16单抗包被培养瓶。

阿秀哥

楼主分离单个核细胞的时候不是有血浆的吗？难道都没灭活保存下来？

金鹏

在科研中NK细胞培养用血清代替血浆是可以的，有的时候考虑到分离的血浆很少，不足以支持整个试验的用量。大部分市面上采购血清不需要进行灭活处理，如果自己需要灭活处理，建议56℃，60min，灭火后高速离心去除沉淀物。你提到的“数目极少”，不知道仅存的细胞状态如何，是否有细胞碎片？还有你的NK培养体系大概是怎么的？这些都不太清楚，如果要说原因，笼统的说会有很多可能影响的因素，譬如你这个培养体系中的因子，配制的培养液中缺少某种因子也可能导致整个培养的失败，并且光靠后期观察和检测也找不到实际的原因。建议下次做的时候设2组及以上的平行...

liuyunmeng2002

复苏再培养的细胞，本身细胞数量就会低，而且还要看复苏技术掌握情况，还要看你的培养体系，跟是血清还是血浆关系不大

孤独山石

2-4天之前所提取的单核细胞,你是冻存还是怎么的，NK细胞在PBMC中本来比例就少，PBMC冻存再复苏后个人认为没有多少存活的了吧。