我养的NK细胞第六天的，健康人外周血，请教下，大多数细胞团贴壁很牢，吹打都不能完全

cyl黄金杖

4 h! P; j9 A! f1 \) l9 a3 H
NK细胞属于半悬浮半贴壁的细胞，从你发的图片来看，第六天细胞长成这样，NK纯度还是不错的。贴壁细胞团块过大，说明操作不及时。操作之前，需要适度力量怕打培养瓶，使贴壁细胞脱落培养瓶，拍不掉的，再用移液管吹打。为什么会沿着培养瓶四周贴壁，是因为4周往往是移液管吹打不到地方，越长斑越大，前几天细胞会自然贴壁，每天观察的时候要拍拍瓶子，大约6、7天开始细胞基本都是抱团悬浮的，像LZ第三张图片左半边部分的那些集落是不错的。

地球外世界

回复 淘知路遥 的帖子
# m# ]3 e8 Z0 _3 {  j; s- Z: k
; v9 `% B- F: L3 m培养NK培养到第几天，成熟，表面CD3-CD16+CD56+多少算正常？培养到多少天终止培养？

地球外世界

回复 快乐男孩 的帖子, ~/ G+ }: T4 ^* ]* N4 N6 j
5 L2 X- e4 s7 h' V7 ~) C; |& q# y
细胞状态感觉挺好的。团怎么会那么集中，而且大，厚？你是加凝集素之类的物质了吗？

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子
' f9 b+ a$ Y% X8 C5 K+ }. @" X4 T5 r0 E* l
回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子
& D) q; F% y! O2 j% C: p" L* Y6 z- A  k  J8 c6 p; C+ P' D
回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子' v4 q/ l$ I  E" z1 B# |
5 j" g& f5 q! f! l4 l$ P! j# p
没有加咧，我们的细胞培养到第4天一个镜下区域有几十个如你图3左半边那种团块，出现图3右边那样的情况个人感觉是没有把细胞拍散，导致细胞大量集中贴壁

快乐男孩

回复 地球外世界 的帖子
2 g# t( U* u- _6 b# N  j$ x0 b
! n5 U+ S1 B5 ~* b2 y) Fnk可以养到21天，流式CD3-要达到60%以上。

lihaifeng

回复 细胞之家 的帖子  O) |" v/ [$ x% s3 A
; u) v  J" ]. S; j3 F- w! E( A
请问NK细胞密度一般到多少需要调整，调整到多大密度？

细胞之家

回复 lihaifeng 的帖子; ]: U2 n) |% \: O9 _7 I
0 N+ c, u" N# @
一般密度控制在1-3E+06之间，不过不同的培养体系，增值情况不同，不同的外周血也不一样，要自己摸索。多做几批次，试试。

shy-shen

回复 快乐男孩 的帖子
5 q" \2 {" e! z3 o* m, S* S5 B% N: ?+ p; X' ~* q% j5 G
你添加了什么因子，我现在做NKT的研发，有些贴壁很牢固，有些几乎不怎么贴壁