请问，western blot 时，若果内参基因和目标基因大小很接近，怎么办啊？

zandr

请问，western blot 时，若果内参基因和目标基因大小很接近，怎么办啊。膜不能剪开？
7 F% z8 ^# \! R7 K5 R% E& X% Y十万火急

shiaiqin

能不能做一下等点聚焦啊?这样他们根据电荷的差异就可以分开了

饶冠华

明显应该同时跑两块胶啊，相同条件下。一块染actin  一块染目的基因。   实在不行你就一个一个染吧  先染目的基因  然后再把抗体洗掉  染actin

have-a-rest

可以选择差异较大的内参，比如b-actin、GAPDH等。相差10kDa左右就可以区分开。
! S8 i# J7 A$ Z" _4 i5 H2 c/ o先染一个，洗了再染另一个也是个办法。

sailboat

保险些：一个一个的染吧

carfan

通常剪开染。太接近可以调整分离胶的浓度，分子克隆上有表格；我们还常用的就是像做磷酸化先染目的洗脱后再染对照。正常情况actin能够再脱膜3次后还染上的。跑两个胶不推荐，容易条带形状不同，发文章有的问题。