iPSC的一个基本问题？求解答！

sunsong7

2013年，邓宏魁研究组曾使用以四个小分子为主的小分子化合物组合对体细胞进行处理，成功逆转体细胞“发育时钟”，实现了体细胞的重编程，将已经特化的小鼠体细胞诱导成为可以重新分化发育为各种组织器官类型的多潜能性细胞，并将其命名为CiPS细胞。使用化学方法诱导体细胞重编程，摆脱了以往的重编程方法对遗传操纵的依赖，为再生医学开辟了一条新途径。最新研究成果中，邓宏魁研究组发现了在化学重编程早期产生的一个上皮样细胞的中间状态，这一中间状态的细胞共表达Sall4, Gata4, Gata6和Sox17等转录因子，在细胞的基因表达谱和体内发育能力上类似于胚外内胚层(XEN)细胞。, I: |4 w: z3 x) K" K8 r
http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S009286741501497X

gxbzjznn

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' x2 N7 ^2 P$ o2 \; @0 H! c7 B
) F  `* N. H4 q请问是哪四个主要小分子？

sunsong7

Pingping Hou, Yanqin Li, Xu Zhang, Chun Liu, Jingyang Guan, Honggang Li, Ting Zhao, Junqing Ye, Weifeng Yang, Kang Liu, Jian Ge, Jun Xu, Qiang Zhang, Yang Zhao, Hongkui Deng. Pluripotent Stem Cells Induced from Mouse Somatic Cells by Small-Molecule Compounds. Science, July 18 2013; DOI: 10.1126/science.1239278

sunsong7

Li X, Zuo X, Jing J, et al. Small-Molecule-Driven Direct Reprogramming of Mouse Fibroblasts into Functional Neurons.[J]. Cell Stem Cell, 2015, 17(2):195-203.

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子! u7 N  v5 C7 g/ ^% t, n4 ~
2 Y' T4 W" j; w' W: {* F( a5 R9 O
对 可是在某些细胞上面，这些小分子并不太好用。需要进一步摸索条件吧！

gscao

回复 gxbzjznn 的帖子, K8 D1 g. Y- t
" d% s; s' |3 v  Z: H: T& w" {
这也是我非常关心的问题。在诱导iPSCs过程中，按诱导时间，哪些基因有规律的先表达，哪些基因后表达，最后表达Oct4和Nanog基因后，基本说明诱导细胞处于iPSCs阶段。例如：AP+ 到SSEA-1+到Oct4+到Nanog+，按时间顺序还有更好的标记基因吗？0 A  Q2 O6 {* Z! o

基因疗法

为什么不试试罗式的iPS鉴定试剂盒，里面有Sox2, OCt4, Nanog，还有Tra-60,80，以及AP staining，这个可以了就打个裸鼠看看畸胎瘤，有公司可以做

张月儿

我们实验室主要以Oct4和NANOG为marker，如果这两个都没有，估计你这次就失败了。还是从头来比较保险。

gxbzjznn

回复 张月儿 的帖子# e7 ?; K% a4 q9 q+ t) Z" l. n
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未必吧 毕竟重编程是一个漫长的过程 可能是大致的方向对了但停滞在某一个Stage 所以需要进一步摸索条件 如果只是没染出来Oct4 和Nanog 就判定实验失败？未免太仓促了 我想你们用的细胞一定是之前别人做出来过的吧？

张月儿

回复 gxbzjznn 的帖子. {& n$ n( a1 {* g- p" j5 B

4 f) h, b* }* K: ]5 i: a9 [( d不是的，我们是自己诱导的，但是一般正常的话，诱导效率还蛮高，所以，如果出现您那种类似情况时，一般会选择放弃，因为不定因素太多了，对后续实验结果也可能产生影响。