基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体。
目前常用的载体有:大肠杆菌中的质粒;λ噬菌体;M13噬菌体;噬菌粒;酵母人工染色体载体;动植物病毒载体。
作为基因工程用的载体具备:复制子;一个或多个利于检测的遗传表型,如抗药性和显色反应等;限制性内切酶单一识别位点,以便外源性基因的插入;适当的拷贝数。
1 质粒
质粒是染色体外小型的环状DNA,大小在1-200kb之间,它可以自主复制,在细胞内的复制分为两种:一种是低拷贝数的质粒,每个细胞内仅含有一个到几个质粒分子,这种被称为严紧型复制质粒;一种是拷贝数在20个以上的多拷贝数质粒,这种被称为松弛型复制的质粒。
(1)pBR322