hES加药后出现分化怎么回事

ailiszhang

电转后加药一段时间，先是从克隆边缘出现一些分化的细胞，然后我就把它们传代，细胞就全呈单个铺在皿上，长了两天不见有扩增，什么情况呀，好着急。

ebio-one

是hES吗？

ebio-one

接种密度多少？有些hES细胞电转后会出现死亡率很高的，你是电转后同时加药培养吗？用什么培养基？

ailiszhang

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是hES，密度4x105，电转后加药的，用的E8，前面都好好的，这次传代后全分化了

ebio-one

有图片吗？电转后有可能会改变细胞的状态的，包括生长能力。能请教是电转后立马加药培养还是培养一段时间后再加药进行培养？

ailiszhang

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ailiszhang

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有图片的，我不知道怎么加图片，是养了一段时间才加药的，在挑克隆后第一次传代就分化了。

wangshumin12311

E8本身耐受应激条件弱一些，细胞电转以后比较脆弱，如果状态没有恢复，加药物的话，耐受药物毒性等 原因导致可能出现分化的现在，建议使用耐受较高的培养基，并且细胞完全恢复状态再加药，此外也要考虑药物和电转基因的种类影响。

ailiszhang

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可是我们实验室的师姐就是用的这个培养基，加的药也一样，她们没有出现我这样的情况。

细胞海洋

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