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大鼠乳鼠神经干细胞取原代是胰酶消化还是机械吹打 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-10-22 19:15 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
从乳鼠脑袋取原代时是用胰酶消化还是机械吹打后再接种呢?有没有哪位前辈亲自试验过两种方法的,传统方法是先消化后机械吹打,但是细胞损伤较大,也有人直接机械吹打分离的,不知道哪种办法更好啊~如果用胰酶一般用什么浓度要消化多久,终止消化又要用什么啊,担心血清终止可能导致神经干分化~求大家讨论指点!
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沙发
发表于 2014-10-24 13:02 |显示全部帖子
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, @4 i2 M" u8 d% |4 N9 m: k  l0 Y; m" C8 N' J6 k: `1 D! v: l
感谢你的建议,我之前看到有的protocol上面用的胰酶和木瓜酶还有DNA酶复合物,我先准备用0.05%的胰酶做原代,用accutase做传代试一试。请问您的木瓜酶消化多久,浓度和剂量是怎么使用的啊,谢谢了~
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藤椅
发表于 2014-10-25 09:10 |显示全部帖子
回复 zb_ming 的帖子
7 ^$ G6 l: t% }5 S4 M+ b4 o0 B2 U0 e. N( Z1 {' |* J4 z$ X. \$ _
可是我直接吹打的吹不散,过滤后还是很多神经球,大的越来越大最后就变黑了。。。小的长的倒是还行,谢谢你的建议!
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板凳
发表于 2014-10-25 09:11 |显示全部帖子
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& N) y; `$ K8 v2 ?: x3 o8 t  o
1 }# H% ^9 X  W+ b2 j谢谢,下次试一试!

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报纸
发表于 2014-10-28 21:53 |显示全部帖子
回复 zmdwj625 的帖子: B' }+ G1 j& V$ H! c. _

' y" ^" }& d. O5 N) N1 |$ `十分感谢,那请问你BSA的终浓度和用量分别是多少啊?
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