质粒转染效率

yeshch

含目的基因的质粒经过酶切测序鉴定都没问题，但是转染效率总是很低（看GFP荧光），收的病毒暂时不敢用；而且同样的操作，其它的基因转染效率却很高，请问可能是什么原因？

xiaostou

有条件的话试试核转的方法，Lonza出的电转仪，直接转到细胞核内。

yeshch

: s. [# @9 e# E; |* z% E5 C: @9 D7 y+ i' [6 F1 l5 S
回复 creatine 的帖子
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6 N2 ?, `4 Z$ @; e' N好像是的，以后继续向你学习

creatine

* I5 I" G( g5 }
9 I9 V/ q0 S+ U不知道你做完，有没感染下然后qpcr检测下看下？如果只是荧光的话不一定靠谱。另外以前是不是在保研论坛见过？看你头像一样。

yeshch

回复 luyue6453 的帖子
* L# x. Q4 r: |8 X. o
2 R, R9 K1 g$ a嗯哦，谢咯！

yeshch

回复 刘彩云 的帖子
" M- [$ D+ \$ o) _. H  {* n+ Q1 l- R" r4 S6 H9 ^8 Y( v
我用的钙转；脂质体转染很贵但效率很高啊；电转更贵！

刘彩云

你用的什么转染方法？脂质体转染效率本来就很低，转不上多少也正常，你可以试试电转。

luyue6453

回复 yeshch 的帖子4 s0 w0 g, z0 l

. N  A) t& `/ R* L. \转不同的基因肯定出现不同的表达量，有的比较易表达，有的根本还不表达，主要看载体的启动子等调控原件，不行就换转染方法

zb_ming

片段大小也影响转染效率。

qingxingruyu

相同的表达载体吗，也遇到过这样的问题，但没想过为什么，同样期待有人能给出解释