关于脐带干细胞用流式分选问题

水念人倦

刚刚接触流式，用的是BD的CANTO2，有没有哪位同学对这款机器比较了解的？分的是uc的P2sc，有没有什么注意事项呢？

青云之上

我们用的是Aria Ⅱ，基本的注意事项应该差不多，1、分选的时候机器温度设为4摄氏度；2、分选接收细胞的流式管内记得装少量培养基，同时没有培养基的管壁一定要润湿一下，细胞会打在管壁上；3、要是分选鞘液要用PBS，不能用BD公司的鞘液，否则对细胞有损害。

水念人倦

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非常感谢！另外还有个问题，我现在多荧光的做的不是很好，想分别做CD44 DC29的单阳 ， 14 34 45的阴性，这样设计可以么？还有就是UC的FSC和SSC大概什么数值啊。

青云之上

单标当然也行，但是就会比较麻烦，而且你做这么多指标，单个分选只能说明你所分选的是某一指标阳性或者阴性细胞群，并不能一定说明你所分选出来的细胞就是你所要的P2sc，你还是要看下文献，确定你所需的细胞群具体使用哪几个指标来确定，如果是单标的就可以，这样最省事，要是多标才能确定还是要多标，否则会走弯路。至于UC的具体前向侧向数值，这个我还真不知道，大概数值由于细胞不同，细胞状态不同，每个人的操作习惯不同，数值都会有不同，所以，这个数值还要看你操作时的具体情况~~·

水念人倦

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' `' F7 e6 [( t' v大神！非常感谢