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楼主: Zhouhaiyan12388
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干细胞培养是不是要特殊培养基   [复制链接]

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发表于 2015-12-1 08:53 |只看该作者
维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
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发表于 2016-1-13 23:17 |只看该作者
本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑 . ^% r; ?7 i% s* u" r- [
/ v2 o. {3 T& |8 `8 c
2% --- FBS
& h; z7 ]6 W6 F- M, Y: E" P  ]1 @5 ng/mL --- rh FGF basic
) M# ~* p- N" z0 p5 ng/mL --- rh FGF acidic
+ x2 V6 @5 N5 t1 s( m6 ?! H+ S/ |3 S5 ng/mL --- rh EGF# J2 F4 m# J/ }" k% ~
2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine
" ~6 ^  n* p0 ?2 l' T- Q6 J7 g7 {---------------------------------------------
3 u+ V* n4 }" _1 _. j" N+双抗( X# H( i' ~3 S& Z$ I
这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液" m2 Y% S# R- o
现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液
* s8 q; w' U2 Y3 e1 j: H4 ^5 u
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
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发表于 2016-5-12 15:22 |只看该作者
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可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
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发表于 2016-8-26 19:21 |只看该作者
哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?

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发表于 2016-11-17 14:27 |只看该作者
我们实验室用的是
4 u; s+ |$ H. g0 e0 J: G9 P15%ksr* b: U0 U& x3 x
高糖DMEN
2 |* k! l% v1 M2 t$ M+ a! U! ?2 r1%NEAA
4 u7 }/ K4 c- k" }; s1%Pruvate
4 J, h9 b# K1 e1%Glutamine& W) p; x0 b+ f  U) H
1%双抗# e8 Y+ {8 K+ h  V" I$ Q4 w3 T$ x( Z5 i
1%FBS+ g! l- o# d: n  D
0.1%LIF外加beta巯基乙醇
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发表于 2017-3-8 10:18 |只看该作者
这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。" \8 Q/ ?5 M8 D0 r( G+ L+ L
如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
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发表于 2017-4-24 08:55 |只看该作者
干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同
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