关于EGM-2的一些问题

vascularbobby

    本人现在准备尝试用EGM-2培养基培养EPC（以前都是用M1991+VEGF+bFGF+20%血清），在晚上看到说EGM-2是500ML的基础培养基外加各种生长因子以及25ML的血清，我想请问的是：8 X3 ^( t9 _# b5 A( F' L
1.那些生长因子是全部加到培养基里么？3 I# F8 e8 v7 C
2.血清浓度是不是最好是20%还要自己重新买血清加进去呢？
8 D4 B9 w$ }9 u5 @" U# `6 g3.一般建议是一个月之内使用完，那么可不可以分装呢？（是加完生长因子再分装？不加直接分装？如果不分装长期保存是不是要冻到-20度的冰箱呢？）
" U5 O. G' ^  H& N" E9 u6 O% ~& v    请各位前辈多多指教啊。

pailishi

回答：
' h6 F2 C2 n  b, S1、全部加$ P+ e9 f4 k) @# P% [2 _3 p
2、我用CC-3156配的血清的是10ML，2%3 g: J) \* R  r9 I2 h' H2 a1 ]
3、确实是短时间内需要用完，半个月内最好，我没有分装过，曾经将加了因子配好的培养基分装冻在-20度，再拿出来使用效果很差

vascularbobby

您好，请问你的2%血清养的细胞状态（贴壁、分化什么）如何呢？

细胞海洋

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: w! ?. }( G, s9 G5 r+ l$ Y. r; N0 i5 R. T/ l6 _( O
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  n/ E1 u! P; n8 l否则他会看不到

细胞海洋

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; t) u$ u$ x$ G' {2 b& r; D1 \, m* R% d1 @2 t7 P
看3楼

honey棉花

请问你养的是什么来源的EPC?有养出克隆吗？

pailishi

回复 honey棉花 的帖子* H* B* H% p/ {2 ^
5 N  B6 v+ |0 c
脐血，EPC克隆  L; h; d; A3 d" i0 x& B$ p$ b3 T* ^
具体你可以看这篇文章，养出来的克隆就像图1中的A，一般10天左右

vascularbobby

回复 pailishi 的帖子  |, n. e6 J) ^  a

3 {  g- B# m9 g% N) R( Z0 T, c% S" C/ s! N
您好，请问你的2%血清养的细胞状态（贴壁、分化什么）如何呢？

vascularbobby

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8 O* b! @1 b3 E3 Z1 x- _- B4 v+ s/ o5 `) o, O, @+ b$ d0 c4 \
谢谢啦。

pailishi

回复 vascularbobby 的帖子/ I, P0 y! |" H) _- [. U3 Y7 |( d$ A

) y4 F% @6 _. V& J在原代克隆数量上有个体差异，但是传代培养的细胞状态很好