新手养SD大鼠BM-MSCs，请大家帮助

ele722

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请教大家3个问题，我用的180gSD大鼠，全骨髓贴壁法，LG-DMEM培养基+10%血清+双抗，原代10d传代。
( a* ?7 l6 h! O1. 总感觉细胞形态不好，这究竟是不是BM-MSCs？
' X7 @9 X# _9 R7 G2. 细胞增殖力差，P1代第2~6天感觉细胞数量没变化，可能是什么原因？) G( {% M) J. {  W/ R( t% \, L
3. P1 4d图视野下的圆形细胞是什么？有些细胞聚团是什么现象？是不是污染？
. [/ e" `; Z5 M; T8 ]先行谢过大家！7 f" b) H- D1 V4 P" ^( Z

light_blue

应该是BMSC，L-DMEM培养基的细胞形态差不多就是这样。圆形的是杂细胞，全骨髓贴壁法有很多其他的细胞，前几代会比较明显。没看出来有污染，聚集成团一般是传代吹打不均匀。不过显微镜的光圈应该没调好，不清晰。

ele722

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1 A6 a, [( f7 @1 s& O! W. m8 x) O6 }' o
十分感谢！
: B1 v7 J0 V0 n& \# d3 }9 a. L请问增殖慢是什么原因呢？  q3 u! s% Y8 I; A" v7 r5 o

light_blue

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- I4 t8 m" E* h  q& e4 X) x: k7 P# ~3 S+ y* h! T: s/ b
你是说原代的增值慢还是传完的？如果没有污染的话，可能和你胰酶消化的时间有关，我一般消化在1min左右，时间长了对细胞的影响很大。

CatchField

一般刚分的原代P0 细胞长满很慢，但传两三代后增殖速度就会很快一般3天左右就能长满。可以换gbico进口胎牛血清，或适当提高血清浓度，增殖速度与血清质量和浓度有很大的关系。

祁门红茶

从形态上看应该是BMSC，但是，我感觉楼主接种细胞的时候密度有点低了，细胞生长是有密度依赖性的，密度适合，细胞会显得长得快。

getingting

我也在培养该细胞，看你的图片，貌似开始接种时细胞量不多，而且间充干集落多了才能生长的快，你的都是分散开生长的，肯定很难生长起来，建议试试DMEM-F12培养基

ele722

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. g3 }8 \1 m- |. w& g! I9 X7 Y' W2 k
新养的一批BMSCs，请大家看一看，那些非常扁平好像是贴壁的（红色方框中）到底是不是细胞啊？状态如何？可以传代了吗？: S  h# Q2 P* y$ n3 d' d

light_blue

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- x1 Y5 ~. b7 {! a' L8 Z5 ]
$ D8 e+ h4 V& g1 z5 D! R1 c( X是细胞，，可以传代了。

倒腾细胞

回复 light_blue 的帖子; R% a) F* v4 C
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谢谢前辈