发一个造血功能重建实验的方案，请指正！

ciweiyuan

细胞移植前的24小时，用325 cGy 半致死剂量处理8到10周大的小鼠，同时腹腔内注射CD122抗体（ 1 mg ⁄ mouse" k3 F( N( J5 h) \: u
），把造血干细胞通过静脉注射的方式打到小鼠体内，移植6到8周后，处死小鼠进行造血功能重建的分析。

ccwei0615

My protocol is 800 Rad for Balb/C or 950 Rad for C57Bl6 24 hrs before the BM cells injection.  (3x10^6 cell >>100% survival after 8 weeks, 1x10^6 cell>>~50% survival after 8 weeks)- S9 v: N  l9 `: v: E
I was told that just 1 HSC is good to reconstitute blood system. But I don't know how do you define your HSC.9 h: r: d! |" y! v, D* b" J; `9 _! H
But if you inject BM cells as I do, you will see GvHD symptom.

ciweiyuan

回复 chutu 的帖子
0 P* F) l/ [+ R, g; k( D7 s; E8 E" T; b% ]4 I% i% y" l/ ]
谢谢大牛的回答，请问你知道上海哪里有做造血重建研究的呢

chutu

人家现在做人的造血干细胞移植已经不用NOD/SCID小鼠了，因为这种小鼠的NK细胞还保留一定活性，对移植物仍然有排斥，所以需要给予抗NK细胞的抗体来提高移植率。现在有了免疫缺陷程度更高的小鼠NSG，国内也出现了类似的小鼠。

ciweiyuan

求问上海这边有哪些实验室能够做造血重建研究呢

ciweiyuan

回复 crazytime 的帖子+ r8 N2 f* H1 K, L
% e5 m/ e9 M3 H
嗯。看下来好像基础培养基和pbs都可以的，谢谢回复

crazytime

回复 ciweiyuan 的帖子
) F) S8 S0 Z. t4 F/ p0 U- Z! L: `
) {' X& @& k$ F% [2 d# K* u我觉得既然是注射，那么对照用生理盐水好点吧？

goblinwang

1--5X10^5/mouse

ciweiyuan

回复 goblinwang 的帖子: z) R4 [  L( t( \! P" U8 n

, `" C1 y; f& M4 l8 Z: Y6 _+ _存活率低是否和辐照的剂量有关？，你一般移植多少细胞量呢

goblinwang

% F/ n! j5 r- D1 _
& x8 @, f7 C: o# L/ J$ d7 ^对照应该是用不加因子，不加血清，不加双抗的基础培养基，比如我用的IMDM，移植的时间选择，我觉得辐照4-6小时内进行，比较好，至于腹腔注射抗体抑制免疫排斥，我没怎么注意，致死剂量照射，免疫系统基本都缺失了，不过我移植实验最后存活率只有50%多点，不知道其他细节是不是产生了影响，如果你有好点的意见和方法可以共同探讨，