大家帮我看看，给点意见，二代冻存复苏的兔MSC，看看细胞形态正常么？谢谢

bishengrong2013

' r6 q" h- M# f4 u
MSC细胞复苏离心速度，大家一般是多少？貌似1000r/min，5min，不给力啊) K- V% ?# R* m- B1 q
大家看看我复苏的细胞，貌似很纠结啊，给点意见
$ x) {* B  C3 K' \  cgibico10%fbs，双抗，高糖gibico dmem

bishengrong2013

分别是复苏后，第8天（第一批细胞），第3 、2、3天的片子（第二批细胞），给点建议，谢谢

fm001982

我们的离心的速度一般是1400--1500 rpm，离心4到5分钟，即使到达1700 rpm 也可以。
& J% p) \+ \7 o1000 rpm貌似低了点~

杨张懿轩

细胞状态貌似不是很好的，还有就是干细胞怎么是成纤维的状态，不好意思我也是刚刚开始做心肌干细胞，请教一下

bishengrong2013

我做的是滑膜间充质干细胞，可能是复苏的时候损失了部分细胞，离心速度低了些，我想把细胞消化下来，重新铺一个小点的培养皿，大家觉得可以么？谢谢

bishengrong2013

回复 fm001982 的帖子# U, C9 P( e7 ]5 g; x
: E$ l, @- g$ Q) p/ r  j) A5 R
谢谢，下次试试，就是怕细胞在高速中会增加死亡

bishengrong2013

回复 fm001982 的帖子; e7 m9 \2 V  h$ e

% g7 z  }+ B: c我做的是滑膜间充质干细胞，可能是复苏的时候损失了部分细胞，离心速度低了些，我想把细胞消化下来，重新铺一个小点的培养皿，大家觉得可以么？谢谢
& r6 p- R3 q; G" u+ _

catheryne

离心速度以细胞大小为准，太小了会丢失细胞，但太大了，会使细胞破裂，而且离心速度应该以离心力为准，我们一般采用300g，ATCC要求复苏的细胞离心时离心力只有125g。同样的离心力，不同半径的离心机所显示的rpm不同，所以不能以rpm为准。发文章时编辑部也往往会让你把rpm改为离心力。5 m/ p3 q" A" B0 d
即使离心时丢掉一部分细胞，只要培养条件合适，细胞还是能长起来的。是不是有必要进一步优化一下培养条件呢？

fm001982

bishengrong2013 发表于 2013-10-21 11:20
' c+ u4 Y+ e- G, k- D4 r回复 fm001982 的帖子4 Y8 ?; n1 g1 [; Y! q
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我做的是滑膜间充质干细胞，可能是复苏的时候损失了部分细胞，离心速度低了些，我想 ...

( Q5 B% R& d" `5 W8 y' j0 _我们做的是脐带的，滑膜的没坐过...
: F$ Z- Z" M- e3 w, i2 R; h5 z2 ]你怀疑细胞数量少的话，可消化下来计数看看，再根据细胞数量接种吧~

浮云一别

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