干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 15246|回复: 1
go

内参GAPDH有长条带,则模板一定没问题吗? [复制链接]

Rank: 2

积分
71 
威望
71  
包包
374  
楼主
发表于 2013-10-8 12:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 小兔子lp 于 2013-10-8 13:03 编辑 - O! e% I- T/ ]1 p4 X2 R

- h$ b& e, ~3 S2 Q8 B- w最近trizol法提取了小鼠胰腺总RNA,测OD值260/280在1.8-2.0之间,但电泳无三条带。因为电泳槽出了问题,电压最高只能达到87V,跑了20分钟,怀疑电泳过程中RNA降解,于是反转cDNA进行RT-PCR。P 内参GAPDH 有条带,但特异性引物无条带,不知是模板、引物还是PCR 条件哪里的问题。向各位请教:反转后PCR , 内参有条带则模板一定没问题吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
39 
威望
39  
包包
254  
沙发
发表于 2013-10-10 10:26 |只看该作者
内参有条带则模板不一定没问题的,提取的RNA有降解或者质量不好的话,内参通常影响不大,均可检测到表达,但如果目的基因表达较少,或者pcr条件不适合的话,是很难得到优秀结果的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-6-4 01:31

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.