神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc
5 ^6 V* h; F* ]. i( C0 F, o完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家
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/ |$ i: g/ C' a采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿4 i' S9 H% n' B) [
1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™: \2 l. {/ [3 U4 ]/ X
CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
9 }, r% p7 T3 j, j5 `  X注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。
- h# E2 \( u6 T. E2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm! k$ m3 h8 [' F' I, a5 d) B9 {/ @
培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。
0 q. a! F; H7 i- E, b3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。7 n( q1 o8 h8 Q  y) [/ j- H
4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。8 W' |1 T" ^# ?" p5 H* x) K
注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。
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采用纤连蛋白包被培养器皿* m7 [4 s8 I) {7 e% {$ H
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。+ \* `' L2 W# x* q
2. 将工作液置于-20°C下保存待用。/ |* j4 x& [$ I  ]. j" }
3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
5 Z( i6 A2 Q5 Q% L+ i* {4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-# \5 t$ {& b1 {% v( L) T, X
mm培养皿: 1.5 mL) 。
4 t8 x% a) c2 X& `. M) `& k5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。8 h# _1 R& K% `' [1 c. C6 q1 W
6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。6 x8 {6 o# `& ?& r) }% K
注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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4 \( c* T; F7 \: U7 o% ?8 e1 y; k! b1 f7 x  z+ ?
非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子* M8 D3 ^1 x# g/ T

  g) y9 Q5 g, A$ g- M我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。
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http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html