干细胞之家论坛 › 干细胞随笔 › 脐血单个核细胞培养

luyue6453 发表于 2013-4-29 16:48

脐血单个核细胞培养

分离完外周血，提取单个核细胞就冷冻了，解冻后传导瓶里，过几天几乎不长，有没有高手指教一下脐血单个核细胞用什么培养液，怎么样才能养起来，怎么养着养着还有贴壁的细胞，还有好多悬浮细胞，应该留哪些细胞？

yaolinzhang 发表于 2013-4-30 09:58

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HSC的培养基可以养，比较贵；一般用RPMI1640，CBMB大部分悬浮，贴壁的细胞是单核细胞；RPMI1640扩增比较困难，不过存活一周应该没问题！

小公 发表于 2013-4-30 10:05

我分离脐血单核后，用DMEM/F12培养基，一周了，仍然看不到贴壁的，估计不行了这次

chips100 发表于 2013-5-2 10:46

pbmc都是悬浮的吧，而且现取现用，冻存损失很大

luyue6453 发表于 2013-5-3 10:19

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我用IMDM,结果一周后下面长了一成圆的贴壁的，还有上面很多悬浮的细胞，下面的很难消化，也不知道是什么细胞，上面的离下来后大概数量是5*10的7次方，也不知道哪些是单个核细胞，

yaolinzhang 发表于 2013-5-3 11:31

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如果你的单个核细胞是从脐血中严格分离的，那么悬浮的及贴壁的均是；贴壁的细胞应该是白细胞中的单核细胞。20ml脐血大概能拿到10million。

硕果累累_555 发表于 2013-5-3 11:55

用DMEM/F1 2 (1:1)+10%FBS 培养即可，一般三天即可贴壁，脐血干细胞一般选取贴壁细胞，一周即可长起来。

crazytime 发表于 2013-6-25 10:15

mem+10%FBS 培养，大概三到五天可以有贴壁细胞了，然后在贴壁细胞有一定量的时候换液，然后传代

小公 发表于 2013-6-25 10:19

脐血间充质干细胞培养，贴壁很明显，但是3周后逐渐脱落，而且很多是圆形的破骨样细胞，长梭形细胞少

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