求助~~肿瘤组织抗原的提取？？？

hwlightning

肿瘤组织抗原的提取方法？
7 l* z7 p8 v+ Z! ~浓度是怎么检测的？刺激DC需要加入的量是多少？

easternliu

七次方个细胞100ulPBS，液氮反复冻融4、5遍，加PBS，离心取上清

hwlightning

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4 }2 v2 i* B9 u3 F+ c0 d是用机械法取细胞还是酶消化法？刺激DC时加入多少量了？

easternliu

回复 hwlightning 的帖子* \( f  S" r: Y  z8 |3 Z. _8 _

) t+ b9 J( z! h) c8 o消化都可以的，完了用PBS洗两遍再重悬，加多少量我不记得了，貌似加的不多。你还是买肿瘤抗原吧，市场上有的卖。

hwlightning

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* I; t/ r! _( v: Z$ V2 J多肽吗？贵不贵

kyo000

回复 easternliu 的帖子$ Z& a, q9 L% H& u9 k) B; ]
2 |3 M. t" }! w' e
为什么我用消化法得到的细胞很少？用的是加EDTA的胰酶消化，消化完后直接过滤，PBS洗一遍重悬计数

easternliu

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6 C/ ~9 Q, L/ A6 L0 q1 v. Q; x$ {( {" `9 {2 G3 ?
嘎嘎，没买过。查了一下，是加1ml pbs离心然后加100ul就行了

easternliu

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不知道你说啥。消化得的细胞少是啥意思。然后过滤是过滤什么。然后又计数。。。