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[请教] OP9细胞怎么这么难养啊   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-12-5 12:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
用于造血分化的OP9细胞怎么这么难养啊,细胞是问上海中科院细胞所买的,我用的培养基是90%MEMa+10%FBS,为什么养不好?细胞都长好长的触角,像神经细胞一样?
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沙发
发表于 2012-12-5 13:51 |只看该作者
说错了,培养基是80%MEMa+20%FBS,MEMa是不带核苷的。

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藤椅
发表于 2012-12-7 11:02 |只看该作者
我曾经也养过,也是上海买的。是比较难养,培养基也是用80%a-MEM+20%FBS。
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板凳
发表于 2012-12-8 10:51 |只看该作者
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我前段时间也养过,培养条件是90%MEMα+10% Gibco FBS,感觉细胞长 的还可以,要注意观察,一旦细胞内出现空泡等,那就是老化了,状态也就不好了。
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报纸
发表于 2013-4-28 10:05 |只看该作者
10%FBS恐怕不好养吧,一般推荐也是15%-20%的FBS+不含核苷的α-MEM。
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2013-4-30 23:22 |只看该作者
一、aMEM+20%FBS,记住一定要是20%血清,虽然在这种培养条件下细胞生长极快,但OP9是对血清要求及其严格的细胞,所以如果状态不好建议考虑血清优化;
4 q' _" t1 l7 n. u- k% g二、培养密度一定不能超过90%,一旦长过细胞会成片卷边脱落,就算把剩余的细胞继续传代也已经意义不大。一般长过的细胞再传代,即使状态OK,支持造血的能力也已经受到影响。所以,状态不好也有可能是细胞源头就有问题,如果其他条件都优化还是不行,那就换细胞吧。
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