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楼主: rongcuizhen2005
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[请教] 液氮罐内冻存细胞是否会污染?   [复制链接]

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发表于 2012-12-14 13:26 |只看该作者
如果是密封完好的话,液氮污染的几率很小,估计是冻存前已经污染了的,或者在复苏过程中污染了
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发表于 2012-12-14 13:53 |只看该作者
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3 n7 b% t6 _9 O7 \7 J& }9 N* u/ D) c, m# T' p1 U
可以采用内旋式冻存管,密封会好些。操作的各个环节都要注意才能保证细胞不被污染。
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发表于 2013-1-5 11:14 |只看该作者
污染的可能性有三:1、冻存前试剂、耗材或操作过程污染。2、看你冻存使用的气相罐?液相罐冻存?还有就是你冻存使用的是漩口冷冻管还是热合冷冻袋?一般情况下冻存造成的污染可能性较小。特别是气相罐。3、解冻过程污染,解冻过程建议将冻存的细胞放入无菌手套包裹后再浸入水浴槽解冻。
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发表于 2013-1-24 10:38 |只看该作者
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9 A5 ~5 j6 K; e8 p& v7 Q  }0 }0 ^1 ~5 s8 C) ?0 `8 d( Y
学习了,谢谢!

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发表于 2013-1-24 10:38 |只看该作者
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6 b/ E" k& B/ D5 c5 ^$ \$ n
9 H) w( K6 t. }学习了,谢谢!

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发表于 2013-1-24 10:39 |只看该作者
回复 ag2017 的帖子
: E. \7 b: I3 O7 M  B/ x
8 ~( P) @6 j. e学习了,谢谢!

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发表于 2013-1-24 13:30 |只看该作者
冻存液有问题的可能性大,还有就是复苏时的操作都有可能污染。我们经常冻存、复苏细胞,基本没污染过。水浴锅也不能排除。如果你能排除不是细胞冻存之前就污染的话,你就从以上原因找。至于过滤冻存液的问题,我们是从来没做过。其他也很少有人做。所以,还是从你的自身找原因吧。
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发表于 2013-1-24 13:31 |只看该作者
冻存液有问题的可能性大,还有就是复苏时的操作都有可能污染。我们经常冻存、复苏细胞,基本没污染过。水浴锅也不能排除。如果你能排除不是细胞冻存之前就污染的话,你就从以上原因找。至于过滤冻存液的问题,我们是从来没做过。其他也很少有人做。所以,还是从你的自身找原因吧。

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发表于 2013-1-24 13:54 |只看该作者
回复 rongcuizhen2005 的帖子$ r. o. Z  R* f2 @( L; ]

/ Z8 Z) ]! C. N7 w2 o9 ?# t我们实验室的冻存液是过滤后用的,血清过滤,DMEM过滤,DMSO过滤,混合到一起后避光4°备用。个人认为,液氮罐内的污染不太大,但有这个可能。更多的是冻存过程中操作引起的污染,或者复苏。水浴锅的水一定要经常更换。。。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2013-1-24 14:40 |只看该作者
细菌真菌什么的-100度以下都会死掉的 唯独支原体 你懂得!!!! 这个问题以前讨论过的, 有可能的,所以冻存管盖子要盖好!!液氮也是污染的媒介,本来灌进去的液氮可能都很脏的
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